[發明專利]硫柳汞在熒光定量PCR中的應用

有效

• 申請號: 201410161379.4
• 申請日: 2014-04-21
• 公開（公告）號: CN105018577B
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 時彥祎;王進;楊心意;覃雨棠
• 申請（專利權）人: 珠海寶銳生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

1.一種熒光定量PCR反應液，其特征在于，所述反應液包含有作為協同增強劑的硫柳汞；所述硫柳汞的終端質量濃度為0.001％，所述反應液還包含有終端質量濃度為2.5％的聚乙二醇4000或終端摩爾濃度為200mM的海藻糖；

所述反應液還包含有耐熱DNA聚合酶，所述DNA聚合酶具有5’-3’聚合酶活性和5’-3’外切酶活性。

2.根據權利要求1所述的熒光定量PCR反應液，其特征在于，所述反應液還包含有耐熱DNA聚合酶，所述DNA聚合酶具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’校正酶活性。

3.根據權利要求2所述的熒光定量PCR反應液，其特征在于，所述的耐熱DNA聚合酶為熱啟動DNA聚合酶，包括化學修飾、抗體修飾或配基修飾的DNA聚合酶。

4.一種包含有硫柳汞的定量PCR反應液，其特征在于，所述反應液按質量分數計包含0.001％的硫柳汞、2.5％的聚乙二醇4000和2～10％的甘油，此外所述反應液還包含有0-100mM的KCl、10～100mM的Tris-HCl、0～50mM的(NH₄)₂SO₄、0.2～0.4mM的dNTP、2～12mM的Mg²⁺和0.01～0.2U/μl的熱啟動DNA聚合酶。

5.一種包含有硫柳汞的定量PCR反應液，其特征在于，所述反應液按質量分數計包含0.001％的硫柳汞、2～10％的甘油，還包含有10～100mM的Tris-HCl、200mM的海藻糖、0-50mM的KCl、0～50mM的NH₄Cl、0.2～0.4的mM dNTP、2～12mM的Mg²⁺和0.01～0.2U/μl的熱啟動DNA聚合酶。

6.根據權利要求5所述的反應液，其特征在于，所述反應液按質量分數計包含0.001％的硫柳汞，還包含200mM的海藻糖，0.02-0.12U/μl的熱啟動DNA聚合酶。

7.一種熒光定量PCR試劑盒，包含權利要求1-5任一項所述的反應液。