[發明專利]一種快速檢測氨基甲酸乙酯含量的化學檢測方法

在審

• 申請號: 201410160860.1
• 申請日: 2014-04-22
• 公開（公告）號: CN103954568A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 黃惠華;張佳佳;劉麗斌;劉智鈞;黃秋婷
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/38
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

技術領域

本發明涉及氨基甲酸乙酯的檢測技術領域，具體涉及一種快速檢測氨基甲酸乙酯含量的化學檢測方法。

背景技術

氨基甲酸乙酯?（Ethyl?Carbamate，簡稱EC，又稱Urethane），不僅是煙草葉及香煙的天然成分，也是發酵食品（如面包，酸牛奶，乳酪，醬油等）和酒精飲料（如葡萄酒，中國黃酒，日本清酒等）生產過程中的伴隨產物。早在20世紀40年代，Nettleship就證明了氨基甲酸乙酯具有致癌作用。氨基甲酸乙酯的致癌作用首先在小鼠的肺部細胞中發現的，之后的相關研究表明氨基甲酸乙酯可以在動物體內造成多位點致癌，如皮膚、肝臟、淋巴組織等。2002年氨基甲酸乙酯已經成為聯合國糧農組織重點監控物質，并制定了國際標準，其含量不得超過20μg/L。2007年國際癌癥研究機構認定EC為2A類致癌物質，與丙烯酰胺同等危險。

為了降低發酵飲料和食品中氨基甲酸乙酯的含量，各國政府都在采取措施，其中簡便、快速、準確的EC含量檢測方法的研究就是其中之一。國內外對于EC含量的檢測方法的研究，從氣相色譜發展到高精密度的GC/MS，乃至更高精密度的GC/MS/MS。隨后，又出現了HPLC-FLD法，HPLC/MS/MS法以及傅立葉變換紅外光譜法等。但是，上述方法存在儀器設備昂貴，難以普及等缺點，尚不能滿足簡便、快速、準確以及成本低的要求。因此，準確、快速的EC含量檢測方法無疑是迫切解決的內容以及未來的研究方向。

國內外有報道將化學法應用到氨基甲酸酯類農藥上。對二甲氨基苯甲醛法，是一種經典的測定尿素含量的方法，具有操作簡便、反應時間短、顯色穩定、相對準確的優點。但是應用化學方法檢測EC的研究尚未見報道。

本發明提供一種快速、低成本檢測氨基甲酸乙酯含量的方法。利用氨基甲酸乙酯與對二甲氨基苯甲醛（PDAB）在酸性條件下進行?Ehrlich反應,?形成檸檬黃色衍生物即對二甲胺基苯亞甲基胺基甲酸乙酯，其質量濃度與吸光度符合比爾定律，從而可用分光光度法進行分析。

發明內容

本發明提供一種快速檢測氨基甲酸乙酯含量的化學檢測方法，利用氨基甲酸乙酯與對二甲氨基苯甲醛（PDAB）在酸性條件下進行?Ehrlich反應，形成檸檬黃色衍生物-對二甲胺基苯亞甲基胺基甲酸乙酯，氨基甲酸乙酯的質量濃度與檸檬黃色衍生物的吸光度呈正相關，即氨基甲酸乙酯濃度越大吸光度越大。根據吸光度的大小和標準曲線即可計算氨基甲酸乙酯的濃度。

本發明提供一種快速檢測氨基甲酸乙酯含量的化學檢測方法，具體步驟為：

標準曲線的制備：?

（1）取1-3mL酸溶液，再加入2-5mL的對二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液；

（2）分別加入濃度為0.05g/L、0.1?g/L、0.2?g/L、0.3?g/L、0.4?g/L、0.5?g/L、1?g/L、2?g/L的氨基甲酸乙酯標準溶液1-4mL，定容后混勻，反應；

（3）反應結束后，在430-450nm波長范圍內用比色皿比色，以不加EC的試管作參比，分別記錄吸光值A₁、A₂、A₃、A₄、A₅、A₆、A₇和A₈?，以EC的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖，即氨基甲酸乙酯的標準曲線；

氨基甲酸乙酯的含量的測定：

（1）取1-3mL酸溶液，再加入2-5mL的對二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液；

（2）?加入1-4mL的氨基甲酸乙酯標準溶液，定容后混勻，反應；

（3）反應結束后，在430-450nm波長范圍內用比色皿比色，記錄吸光度，利用所得的氨基甲酸乙酯的標準曲線，計算得到氨基甲酸乙酯的含量。

進一步優化的，所述氨基甲酸乙酯購自阿拉丁試劑（上海）有限公司，其純度為99%以上；所述氨基甲酸乙酯與對二甲氨基苯甲醛需在酸性條件下發生Ehrlich反應，所述酸溶液為鹽酸與蒸餾水按照體積比為1:2-2:1的比例混合的溶液，所述酸溶液用量為1-3mL。

進一步優化的，所述對二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液濃度為3-6g對二甲氨基苯甲醛溶于100mL乙醇中，即3-6g/100mL乙醇。

進一步優化的，所述反應為在水浴溫度15-55℃下反應15-60min。

進一步優化的，所述定容為用蒸餾水定容至10mL。

本發明的對二甲氨基苯甲醛法與現有技術相比，具有以下優點：