[發明專利]擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6在促進煙草腺毛生長中的應用

無效

• 申請號: 201410158764.3
• 申請日: 2014-04-18
• 公開（公告）號: CN103966232A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 甘銀波;顏安;安麗君;周忠靜;孟小芳;劉伯涵;張愛冬
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/84;C12N1/21;C12R1/01
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 馬士林

技術領域

本發明屬于生物工程技術領域，尤其涉及一種擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6在促進煙草腺毛生長中的應用。

背景技術

煙草已成為21世紀全球市場上最重要的經濟作物之一，它不僅是100多個國家煙農的收入來源，而且整個煙草行業涉及到不同生產部門和批發零售環節，已成為許多國家的重要經濟力量；隨著煙草業的發展，許多國家的地方及當地政府的稅收有了大幅度提高。

煙草是高效益作物，我國煙草的種植面積和產量均居世界第一位。在所有煙葉類型中，烤煙種植最為廣泛。我國是全球生產烤煙最多的國家，我國烤煙種植面積和總產量都居世界首位，其烤煙產量約占全球烤煙產量的50%左右，發展優質煙葉不管是對煙農還是卷煙工業都是十分重要的。煙草又是高稅利商品，農業稅利30％左右，工業稅利60％以上，1987-2001年，煙草行業實現的稅利合計連續14年高居國民經濟各行業之首，為國家建設做出了巨大的貢獻。因此，研究和開發綜合性狀良好的煙草品種，提高煙草的生產水平對于增加國家和地方財政收入，解決“三農”問題和新農村建設具有十分重要的意義。

煙草育種重點考慮的問題是煙葉香味和煙葉安全性等，提高香氣品質是國內外煙草育種的核心之一。煙葉香氣不足是影響煙葉質量的一個主要因素，尤其目前低煙堿、低焦油的煙草產業發展方向，使得煙葉香味不足的問題更為突出。煙草腺毛是煙葉表皮系統的重要組成部分，煙葉腺毛膠狀分泌物與煙葉香氣物質產生密切相關，而腺毛密度和類型直接影響著腺毛分泌物的質和量，而分泌物的量又直接影響葉片的香氣品質，腺毛密度越大，多細胞頭部的腺毛所占比例越大，葉片香氣品質越好（煙草葉片腺毛及其分泌物研究進展.貴州農業科學，2009,37（8）：61～64）。。因此，煙葉腺毛的研究對煙草新品種的選育和優質煙草栽培技術的實施，以及提高煙草香氣質和香氣量的研究都具有重要的指導意義。目前國內外雖然已在煙草腺毛方面進行了大量研究，但對腺毛形成和發育的調控機制和腺毛密度的遺傳規律，特別是在腺毛與煙草香氣形成之間關系的研究方面還遠遠不夠，因此，從分子水平上研究控制煙草腺毛及香氣形成的機制，不僅具有重要的理論意義，同時也具有潛在的應用價值。

發明內容

本發明提供了一種擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6在促進煙草腺毛生長中的應用，在煙草中外源表達擬南芥指蛋白基因ZFP6能夠提高煙草葉片腺毛的生長密度。

一種擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6在促進煙草腺毛生長中的應用，所述的擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的應用，包括：將所述的擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6連入植物表達載體中，構建得到重組表達載體，再將所述的重組表達載體轉化煙草。

重組表達載體的構建可采用常規方法，如可采用Gateway系統（Invitrogen公司）將擬南芥ZFP6基因（即擬南芥鋅指蛋白基因ZFP6）連入植物表達載體中。

所述的植物表達載體可以為pH2GW7、pK2GW7等。

所述的重組表達載體中，啟動所述擬南芥ZFP6基因表達的啟動子為強啟動子。強啟動子能夠啟動擬南芥ZFP6基因過表達，可提高煙草葉片腺毛的生長密度。所述的強啟動子為35S。

轉化煙草時，可采用農桿菌介導轉化的方法，所述的農桿菌具體可以為農桿菌GV3101、EHA105等。

所述煙草的品種可以為珊西煙，但不僅限于珊西煙。

本發明還提供了一種重組表達載體，包括原始載體以及插入所述原始載體的目的基因，所述目的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的重組表達載體中，所述的原始載體可以為pH2GW7、pK2GW7等。

本發明還提供了一種包含所述植物表達載體的重組轉化子。

所述的重組轉化子中，宿主菌可以為農桿菌，具體可以為農桿菌GV3101、EHA105等。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：

本發明通過克隆擬南芥ZFP6基因，并在煙草中進行遺傳轉化，過量表達外源擬南芥ZFP6基因能夠顯著提高煙草葉片腺毛數量，提高腺毛生長密度，而對不分泌次生代謝產物的保護毛數量沒有影響。本發明有助于研究腺毛形成和發育的調控機制和腺毛密度的遺傳規律，基于腺毛與煙草香氣的密切關系，本發明能夠提高煙草葉片香氣品質，有助于研究控制煙草腺毛及香氣形成的機制，具有重要的理論意義及潛在的應用價值。

附圖說明

圖1為野生型（WT）和轉基因煙草（35S:ZFP6）不同齡期葉片表皮毛數量統計。

具體實施方式