[發明專利]PCSK9拮抗劑

在審

• 申請號: 201410158415.1
• 申請日: 2014-04-18
• 公開（公告）號: CN105001336A
• 公開（公告）日: 2015-10-28
• 發明（設計）人: 楊彤;沈毅珺;王羅春
• 申請（專利權）人: 上海復旦張江生物醫藥股份有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;C12N15/13;C12P21/08;A61K39/395;A61P3/06;A61P9/10;A61P9/00
• 代理公司: 上海天翔知識產權代理有限公司 31224
• 代理人: 呂伴

技術領域

本發明涉及單克隆技術領域，具體涉及一種PCSK9拮抗劑。?

背景技術

蛋白原轉化酶枯草溶菌素-可新9型(proprotein?convertase?subtilisin-kexin?type9)(下文稱為“PCSK9”)，又名神經凋亡調節轉化酶1(“NARC-1”)，是一種蛋白酶K樣枯草桿菌酶，經鑒定為分泌型枯草桿菌酶家族的第9個成員；(Seidah等，2003PNAS100：928-933)。編碼PCSK9的基因定位在人染色體1p33-p34.3；Seidah等，見上文。PCSK9在能夠增殖和分化的細胞中表達，包括例如肝細胞、腎間質細胞、回腸(intestinal?ileum)和結腸上皮以及胚胎端腦神經元(Seidah等，2003PNAS100：928-933)。?

PCSK9在肝細胞和神經元細胞的分化中發揮作用(Seidah等，2003PNAS100：928-933)，在胚胎肝臟中高表達，并且與膽固醇體內平衡強烈相關。最近的研究似乎暗示了其在膽固醇生物合成或攝取中的特定作用。在飼喂膽固醇的大鼠的研究中，Maxwell等發現，PCSK9以類似于牽涉膽固醇生物合成的三個其他基因的方式被下調(Maxwell等，2003J.Lipid?Res.44：2109-2119)。有趣的是，和牽涉膽固醇代謝的其它基因一樣，PCSK9的表達也受甾醇調控元件-結合蛋白(“SREBP”)的調控(Maxwell等，2003J.Lipid?Res.44：2109-2119)。后來研究證明此類調控在參與脂蛋白代謝的其它基因中非常典型(Dubuc等，2004Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.24：1454-1459)。PCSK9的表達被他汀類(statins)上調，這是由于這些藥物的降膽固醇效應。此外，PCSK9啟動子有兩個涉及膽固醇調控的保守性位點、甾醇調控元件和Sp1位點；見上文。PCSK9的腺病毒表達已顯示可導致循環LDL顯著的時間依賴性增加(Benjannet等，2004J.Biol.Chem.279：48865-48875)。此外，刪除PCSK9基因的小鼠肝LDL受體水平增加，LDL從血漿中清除更快；Rashid等，2005Proc.Natl.Acad.Sci.USA102：5374-5379。最近據報道，將用PCSK9瞬時轉染的HepG2細胞的培養基轉移到未轉染的HepG2細胞時，減少細胞表面LDLR的數量和LDL的內化；參見Cameron等，2006Human?Mol.Genet.15：1551-1558。結論是PCSK9或者經PCSK9作用的因子被分泌并能夠降解轉染的和未轉染的細胞中的LDLR。更近來，據證實，加到HepG2細胞培養基中的純化PCSK9具有以劑量和時間依賴性方式減少細胞表面LDLR數目的作用(Lagace等，2006J.Clin.Invest.116：2995-3005)。?

PCSK9基因中的很多突變已確定與以下病癥相關：常染色體顯性高膽固醇血癥(“ADH”)、以血漿中低密度脂蛋白(“LDL”)顆粒顯著升高為特征的遺傳性代謝紊亂(可?導致早發性心血管衰竭)；（Abifadel等，2003Nature?Genetics34：154-156；Timms等，2004Hum.Genet.114：349-353；Leren，2004Clin.Genet.65：419-422）。后來Abifadel等發表的對S127R突變的研究報道，攜帶這種突變的患者血漿中總膽固醇和apoB100較高，原因是(1)含有apoB100的脂蛋白例如低密度脂蛋白(“LDL”)、極低密度脂蛋白(“VLDL”)和中密度脂蛋白(“IDL”)的過量產生，和(2)所述脂蛋白清除或轉化的相關減少。?

綜合起來，上述研究證實了PCSK9在調控LDL產生中起作用的事實。PCSK9的表達或上調與增加的LDL膽固醇的血漿水平有關，PCSK9表達的抑制或缺乏與LDL膽固醇血漿水平低有關。值得注目的是，與PCSK9序列變化相關的較低水平的LDL膽固醇可提供針對冠心病的保護（Cohen，2006N.Engl.J.Med.354：1264-1272）。臨床試驗已證明LDL膽固醇含量減少與冠狀動脈(coronary)事件率直接相關（Law等，2003BMJ326：1423-1427）。此外，最近已證明，血漿LDL膽固醇含量終生中度減少與冠狀動脈事件的發生率大幅減少顯著相關；甚至在非脂質相關心血管風險因子高度盛行(prevalence)的群體中也是如此。因此，對LDL膽固醇含量進行管理控制大有裨益。?