[發(fā)明專利]一種蒙藥玉簪花的指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410158382.0
• 申請(qǐng)日: 2014-04-21
• 公開（公告）號(hào): CN103926346A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 薛培風(fēng);魏慧;解紅霞;李春燕;王娜娜;李曉娟;王麗;王靜;張金花;趙子龍;高建萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種蒙藥玉簪花的指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。?

背景技術(shù)

近年來國際植物藥市場需求量不斷增長，我國植物藥資源面臨著藥材原料嚴(yán)重缺乏的現(xiàn)狀。中蒙藥原料藥材由于受基源、產(chǎn)地環(huán)境氣候、采收時(shí)間、加工方法等一系列過程的影響，所含成分也往往相差很大，質(zhì)量真實(shí)性、均一性、穩(wěn)定性很難保障。同時(shí)在巨額利潤的誘惑下，不少藥商不顧消費(fèi)者的生命安全，以假充真，以次充好。中蒙藥質(zhì)量問題成為中蒙藥國際化的一個(gè)技術(shù)瓶頸。目前中蒙藥的質(zhì)量控制主要以已知的一種或幾種活性成分或指標(biāo)成分為控制質(zhì)量的指標(biāo)，通過定性和定量的分析，判斷藥品的真?zhèn)蝺?yōu)劣。但是中蒙藥的療效既不是任何單一活性成分的作用，也不是多種成分活性的簡單相加。所以，宏觀地綜合分析已成為中蒙藥質(zhì)量控制發(fā)展的必然趨勢，現(xiàn)階段色譜指紋圖譜就是適應(yīng)這一特點(diǎn)的質(zhì)量控制模式，能夠比較全面地、綜合地反映藥材中所含化學(xué)成分。?

蒙藥玉簪花現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》(蒙藥分冊(cè))，其中化學(xué)方面僅有黃酮類成分的理化鑒別，無薄層鑒別項(xiàng)，也無含量測定項(xiàng)。簡單的質(zhì)量控制方法致使該藥材的使用、生產(chǎn)和流通都受到限制，臨床用藥的有效性和安全性沒有保證。目前本課題組和國內(nèi)相關(guān)課題組對(duì)玉簪花的質(zhì)量控制方面進(jìn)行了相關(guān)的研究，建立了藥材中總黃酮、總皂苷的含量測定方法及單一成分的薄層鑒別和含量測定方法。無論是法定的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)還是目前已有的標(biāo)準(zhǔn)研究，都未能從整體的角度全面綜合地反映玉簪花藥材的化學(xué)內(nèi)涵和質(zhì)量。?

本發(fā)明利用高效液相色譜法構(gòu)建了蒙藥玉簪花的色譜指紋圖譜分析方法，并通過多批次藥材的分析確定了該藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。此方法簡單方便、快速有效，可用于從宏觀角度全面評(píng)價(jià)蒙藥玉簪花藥材的質(zhì)量。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述玉簪花藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種蒙藥玉簪花的指紋圖譜的建立方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，用于宏觀評(píng)價(jià)玉簪花藥材質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。該發(fā)明方法簡單方便、快速有效，可用于從宏觀角度全面評(píng)價(jià)蒙藥玉簪花藥材的?質(zhì)量，對(duì)于提高玉簪花藥材及其成方制劑質(zhì)量，促進(jìn)該藥材及其制劑的現(xiàn)代研究和深層次開發(fā)利用具有重要意義。其具體技術(shù)方案為：?

在蒙藥玉簪花現(xiàn)有藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究結(jié)果的基礎(chǔ)上利用高效液相色譜法構(gòu)建蒙藥玉簪花的色譜指紋圖譜分析方法，并結(jié)合多批次玉簪花藥材的指紋圖譜分析，確定該藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜。本方法的特點(diǎn)：簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好，可全面、客觀、有效反映蒙藥玉簪花藥材的質(zhì)量。?

一種蒙藥玉簪花的指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：?

(a)供試品溶液的制備：將干燥的玉簪花藥材粉碎，過40目篩，取藥材粉末約0.5g，精密稱定，置100mL具塞錐形瓶中，分別精密加入40％～100％甲醇或40％～100％乙醇40～140mL。分別超聲提取30～60min或回流提取30～75min，濾過，洗渣三次，每次10mL，合并濾液。減壓回收溶劑至于，用10％甲醇定容至25mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，備用。?

(b)對(duì)照品溶液的配制：分別取下列八種對(duì)照品適量，用10％甲醇溶解定溶，制成一定濃度的溶液，微孔濾膜(0.45μm)濾過，備用。?

1.山奈酚-3，7-二-O-β-D-吡喃葡糖苷?

2.山奈酚-3-O{β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-[a-L-吡喃鼠李糖基(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷}-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷?

3.山奈酚-3-O-蕓香糖苷-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷?

4.山奈酚-3-O{β-D-葡萄糖基(1→2)-[β-D-葡萄糖基(1→3)]-[a-L-鼠李糖基(1→6)]-β-D-葡萄糖苷}?

5.山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷?

6.山奈酚-3-O{β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-[a-L-吡喃鼠李糖基(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷}?

7.山奈酚-3-O-蕓香糖苷?

8.7-甲氧基-山奈酚-3-O-蕓香糖苷?

(c)色譜條件：色譜柱：各種反相C₁₈柱；流動(dòng)相：甲醇-水、甲醇-水-磷酸、乙腈-水、乙腈-水-磷酸；洗脫梯度：5％B(0min)～100％B(90min)；檢測波長：220～400nm；柱溫：20～35℃；流速：1mL/min；進(jìn)樣量：20μL。?