[發明專利]抗ALS抑制劑類除草劑播娘蒿的PCR檢測方法及試劑盒有效
| 申請號： | 201410158000.4 | 申請日： | 2014-04-18 |
| 公開（公告）號： | CN103923996A | 公開（公告）日： | 2014-07-16 |
| 發明（設計）人： | 崔海蘭;李香菊;王藏月 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院植物保護研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100193 北京市海淀區圓*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | als 抑制劑 除草劑 播娘蒿 pcr 檢測 方法 試劑盒 | ||
1.用于檢測抗ALS抑制劑類除草劑播娘蒿的特異性PCR引物對，其特征在于，包括用于特異性擴增播娘蒿B-ALS-1基因的引物對以及用于特異性擴增播娘蒿B-ALS-2基因的引物對，引物序列如下：
1）用于特異性擴增播娘蒿B-ALS-1基因的引物對：
正向引物B-ALS-1F：5’-TCTATCTCTCGCTCCTCTCC-3’
反向引物B-ALS-1R：5’-CAAACAAACAGCAGTAGCG-3’
2）用于特異性擴增播娘蒿B-ALS-2基因的引物對：
正向引物B-ALS-2F：5’-CTTCTTCTCCTCCAACGA-3’
反向引物B-ALS-2R：5’-GCCATCTCCTTCCGTTATGA-3’。
2.含有權利要求1所述引物對的用于檢測抗ALS抑制劑類除草劑播娘蒿的試劑盒。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括dNTPs、Taq?DNA聚合酶、Mg2+、PCR反應緩沖液中的至少一種。
4.根據權利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括標準陽性模板。
5.抗ALS抑制劑類除草劑播娘蒿的PCR檢測方法，其特征在于，利用權利要求1所述引物對或權利要求2-4任一項所述試劑盒檢測抗ALS抑制劑類除草劑播娘蒿。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）提取樣品中的DNA；
2）以步驟1）中提取的DNA為模板，進行PCR擴增反應；
3）分析PCR產物。
7.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于，PCR反應體系以20μl計為：
8.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于，PCR反應條件為：94℃3分鐘；94℃1分鐘，56℃1分鐘，72℃1分鐘，共30個循環；72℃10分鐘。
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