[發明專利]豬偽狂犬病病毒基因缺失株、疫苗組合物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410157536.4
• 申請日: 2014-04-18
• 公開（公告）號: CN105018433B
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 張許科;孫進忠;譚菲菲;肖燕;田克恭
• 申請（專利權）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/245;A61P31/22;C12R1/93
• 代理公司: 北京華夏正合知識產權代理事務所(普通合伙) 11017
• 代理人: 韓登營

本發明提供了一種豬偽狂犬病毒弱毒株，其中，該豬偽狂犬病毒弱毒株為不能表達RR蛋白的豬偽狂犬病毒變異株。本發明還提供了包含該豬偽狂犬病毒弱毒株抗原的疫苗組合物，及其制備方法和應用。經活疫苗免疫原性實驗和致病性免疫原性試驗證明，該豬偽狂犬活疫苗具有很好的保護力，基本沒有臨床癥狀，顯示出很好的免疫保護。

技術領域

本發明涉及一種豬偽狂犬病病毒基因缺失株、及其制備的疫苗組合物，以及制備方法和應用，屬于動物病毒學領域。

背景技術

偽狂犬病，又稱Aujeszky氏病，是由皰疹病毒科（Herpesviridae）α亞科中的豬皰疹病毒Ⅰ型（Suid herpesvirus1strain）所引起的豬、牛、羊等多種家畜、家禽和野生動物的一種以發熱、奇癢(除豬外)及腦脊髓炎為主癥的急性傳染病。豬的偽狂犬病在我國廣泛存在，危害嚴重，是制約規模化豬場生產的主要疫病之一。它能引起妊娠母豬流產、死胎或木乃伊胎和仔豬出現神經癥狀、麻痹，死亡率高。PRV具有較強的泛嗜性、神經嗜性及潛伏感染特性，在外周神經系統可以長期潛伏感染，當潛伏病毒被激活變成有感染力的病毒，被潛伏感染的宿主就會發病。

現在技術普遍使用gE缺失的偽狂犬弱毒疫苗防治豬偽狂犬病，使用采用自然缺失或者人工缺失某些毒性基因的毒株來預防豬偽狂犬病，例如BUK株是Bucharest株經過雞胚和雞胚成纖維細胞800次傳代獲得的弱毒疫苗株，其缺失了大部分gE基因。還有人工缺失的偽狂犬SA215毒株HB-98株等用于預防豬偽狂犬病。

最近的研究報道稱豬偽狂犬病發生了新的特點，突出表現為任何年齡的豬都會感染，可在豬群水平傳播，潛伏期短（1～2天），發病率在10%～100%之間，發病豬死亡率在10%～100%之間（仔豬死亡率可高達100%），感染后可引起豬只高熱（40～42℃，持續3日以上），呼吸困難，腹瀉，喘，咳嗽，打噴嚏，后肢麻痹，犬坐，突然倒地，抽搐，側臥不起，角弓反張，泳狀劃水，最后衰竭而死，并可引起種公豬精液質量下降，懷孕母豬流產（高達35%），早產，死胎，弱仔（弱仔14日齡前全部死亡）等繁殖障礙癥狀。現有技術的疫苗免疫豬只后不能完全抵抗野毒攻擊，依然會出現高熱，精神沉郁，食欲下降或廢絕等癥狀，感染率超過80%，發病率超過30%，死亡率在10%～20%之間。例如彭金美等.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析.中國預防獸醫學報，2013，35(1)：1-4；童武等.免疫后發病仔豬中偽狂犬病毒的分離和鑒定.中國動物傳染病學報，2013,21(3):1-7;Yu et al.,PathogenicPseudorabies Virus,China,2012.Emerging infectious Diseases.2014,20(1):102-104;An et al.,Pseudorabies virus variant in Bartha-K61-vaccinated pigs,China,Emerging infectious Diseases.2013.19(11)：1749-1755），現有技術還沒有疫苗能夠解決針對豬偽狂犬變異株引起的偽狂犬病。

發明內容

為解決現有技術的不足，本發明提供了一種活的減毒豬偽狂犬病毒株，用于防治變異偽狂犬病毒引起的豬狂犬病。其中，所述豬偽狂犬病病毒株不能表達功能性RR蛋白質。

本發明的主要目的在于提供一種豬偽狂犬病毒弱毒株，其中，所述豬偽狂犬病毒弱毒株為不能表達RR蛋白的豬偽狂犬病毒株，優選地，所述偽狂犬病毒株為偽狂犬變異株。

術語“不能表達功能性RR蛋白質＂是指豬偽狂犬病毒RR基因中的任何突變，如插入、替代或者缺失突變而導致其與野生型豬偽狂犬相比毒力降低時。通常，突變是一個或多個核苷酸的插入、替換或者缺失。特別地，由于核苷酸插入導致的編碼氨基酸移碼。結果，將合成截短的或氨基酸發生變化的RR蛋白，其具有降低的功能性或者甚至根本沒有功能性。