[發明專利]用于給禽類經眼施用疫苗的包含殼聚糖的組合物

無效

• 申請號: 201410156297.0
• 申請日: 2009-09-04
• 公開（公告）號: CN103893758A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: Y·伽丁;V·帕萊;S·科姆特
• 申請（專利權）人: 詩華動物保健股份有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/17;A61P31/14
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 林遠成

本申請是申請日為2009年9月4日、申請號為200980138635.5的同名申請的分案申請。

發明領域

本發明涉及通過經眼途徑給禽類物種施用的包含殼聚糖(chitosan)和疫苗的疫苗組合物以及接種的方法或程序(其包括使用殼聚糖以增加或增強禽類物種中對疫苗的免疫應答)。

發明背景

疫苗是給受試者施用以通過誘導對特定微生物(例如細菌或病毒或寄生蟲)的主動免疫來增強對感染的抗性的抗原性材料的制劑。可將疫苗與佐劑共施用以增強免疫應答。佐劑的實例包括增強免疫系統對抗原的應答的化學和多肽免疫刺激劑。此類佐劑可包括例如氫氧化鋁、磷酸鋁、植物和動物油以及礦物油、細菌毒素、幾丁質(chitin)衍生物和殼聚糖等，可將佐劑以足以增強免疫應答的量與疫苗一起施用。

通常通過胃腸外注射例如皮下或肌內注射施用疫苗和佐劑。特別地，對于治療上呼吸道的感染，還可進行至多種動物物種的鼻粘膜的直接施用。例如，歐洲專利EP865297B1描述了將來自病原體的蛋白質或多糖抗原和作為佐劑的殼聚糖鼻內共施用至小鼠。通過氣霧劑、滴劑或吹入法將此類鼻內組合物配制為微球體形式的干粉，并且通過另外的幾次連續鼻內施用允許增強IgA粘膜體液和IgG全身性免疫應答。

申請人現已發現，在相同的接種程序中與禽類疫苗組合使用的殼聚糖具有極大地增強細胞介導的免疫應答同時維持已接種的鳥類的高體液和全身性免疫應答的潛力(當通過經眼途徑施用時)。此外，已發現，殼聚糖作用于禽類結膜并且導致疫苗在禽類組織中的存留(persistence)顯著增加。

發明概述

本發明涉及經眼施用給禽類物種的疫苗組合物，其包含一種或多種疫苗和有效佐劑量的殼聚糖。本發明還涉及免疫禽類物種的方法，其包括給禽類物種經眼施用疫苗組合物，以及一種或多種疫苗與殼聚糖的組合在制造用于經眼施用以有效地免疫禽類物種抵抗感染性疾病的疫苗組合物中的用途。本發明還涉及禽類接種試劑盒，其包括疫苗組合物和用于所述疫苗組合物的經眼施用的工具或裝置。

附圖概述

圖1:舉例說明接種的時間線。

圖2:舉例說明抗原回憶(antigen?recall)方案。

圖3:顯示如在經眼施用具有或不具有殼聚糖的VITAPEST?L(Ceva?Phylaxia,Hungary)后2至5周測量的雞γ-干擾素的產量水平(光密度)。

圖4:顯示已通過經眼途徑接受具有或不具有殼聚糖的UNI?L或VITAPEST?L的SPF雞的禽類組織中以卵感染劑量(EID₅₀)表示的新城疫(ND)疫苗株的滴度。

圖5:顯示已通過經眼途徑接受具有或不具有殼聚糖的UNI?L(Ceva?Phylaxia,Hungary)或VITAPEST?L的常規蛋雞的禽類組織中以卵感染劑量(EID₅₀)表示的新城疫疫苗株的滴度。

圖6A和6B:顯示在用活新城疫疫苗(NDV)接種SPF雞(圖6A)和常規蛋雞(圖6B)后的免疫活性和特異性細胞介導的免疫。通過經眼途徑，在一日齡時用單獨的VITAPEST?L(黑色柱)或與殼聚糖組合的VITAPEST?L(灰色柱)接種鳥類。未接種的動物以白色柱標示。用PMA/Iono絲裂原(0.1μg/ml)gp-NDV回憶抗原(1μg/ml)刺激脾細胞，在72小時的活化后收獲被刺激的細胞的上清液。通過ChIFNγ捕獲ELISA測定ChIFNγ的產量。結果相應于在各時間點上的光密度(O.D.)的平均值±標準差(n=5)。具有不同上標的平均值±標準差差異顯著(P<0.05)。

圖7A和7B:顯示在用活ND疫苗接種SPF雞(圖7A)和常規蛋雞(圖7B)后眼淚(lachrymal)抗體介導的免疫。在一日齡時通過經眼途徑用單獨的(黑色柱)或與殼聚糖組合的(灰色柱)VITAPEST?L接種鳥類。未接種的動物以白色柱標示。數據表示在接種后指定的時間上通過ELISA測定的吸光度值(O.D.)的平均值±標準差(n=5)。將淚液樣品以1:4(對于IgA/G)和1:32(對于IgM)稀釋。具有不同上標的時間點上的平均值±標準差差異顯著(P<0.05)。N.D.=由于在NDV特異性IgA和IgG測量后剩余有限量的樣品而未測定的。