[發(fā)明專(zhuān)利]一種含有長(zhǎng)節(jié)段纖維的膠原蛋白

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410153024.0
• 申請(qǐng)日: 2014-04-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103937861A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝磊;畢宏偉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 天津市賽寧生物工程技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P21/06
• 分類(lèi)號(hào): C12P21/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種含有長(zhǎng)節(jié)段纖維的膠原蛋白，其中含有長(zhǎng)度不低于240nm的膠原纖維。

背景技術(shù)

膠原蛋白是多細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)分布最廣、含量最多的一種結(jié)構(gòu)蛋白，在動(dòng)物體內(nèi)起著廣泛的承載作用，并表現(xiàn)出優(yōu)異的力學(xué)性能。但人工提取的膠原由于各種原因，其纖維的長(zhǎng)度過(guò)短，且排列比較散亂，目前雖被大量地應(yīng)用于相關(guān)的醫(yī)用材料和組織工程材料中，其力學(xué)性能卻表現(xiàn)不佳，直接影響了材料的力學(xué)性質(zhì)，盡管人們通過(guò)多種交聯(lián)手段對(duì)其進(jìn)行改造，但最終材料的表現(xiàn)仍難盡如人意，我們通過(guò)對(duì)酶解部分條件的改變，從而保留了很多長(zhǎng)節(jié)段纖維，使膠原蛋白的力學(xué)性能有了很大的提高，可廣泛應(yīng)用于骨、肌腱、皮膚、血管等組織工程材料中，使其力學(xué)性能得以改善。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種含有生理鹽的膠原海綿產(chǎn)品。其步驟如下：

1、取預(yù)處理并搗碎的動(dòng)物皮或跟腱100g，置于2000～5000ml濃度為5mmol/L～0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為0～10℃，緩慢加入濃度為1～10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液為止；

2、將溫度升至20～35℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻；

3、將溫度重新調(diào)整為0～10℃，繼續(xù)恒溫60～70小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品；

具體實(shí)施方式

實(shí)施例一

預(yù)處理并搗碎的牛皮100g，置于2000ml濃度為5mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為0℃，緩慢加入濃度為1mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至28℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至0℃，繼續(xù)恒溫68小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。

實(shí)施例二

預(yù)處理并搗碎的牛腱100g，置于5000ml濃度為10mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為10℃，緩慢加入濃度為5mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至30℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至10℃，繼續(xù)恒溫60小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。

實(shí)施例三

預(yù)處理并搗碎的豬皮100g，置于3500ml濃度為50mmol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為5℃，緩慢加入濃度為10mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至25℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至5℃，繼續(xù)恒溫70小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。

實(shí)施例四

預(yù)處理并搗碎的豬跟腱100g，置于4000ml濃度為0.1mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為3℃，緩慢加入濃度為8mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至20℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至2℃，繼續(xù)恒溫69小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。

實(shí)施例五

預(yù)處理并搗碎的牛跟腱100g，置于4500ml濃度為0.5mol/L醋酸配置的PH3.5的溶液中，控制溫度為8℃，緩慢加入濃度為3mg/ml的三磷酸腺苷ATP水溶液，邊加邊攪拌，直至膠原溶液全部變成白色乳液。升溫至22℃，10分鐘內(nèi)攪拌至溶液中不均勻沉淀消失，加入比活性為1∶10000的胃蛋白酶300mg，繼續(xù)攪拌均勻。降溫度至8℃，繼續(xù)恒溫65小時(shí)，離心取上清液，鹽析透析后，凍干為成品。