[發明專利]一種對克羅諾桿菌O抗原特異的核苷酸及其應用有效
| 申請號： | 201410150358.2 | 申請日： | 2014-04-16 |
| 公開（公告）號： | CN103898227A | 公開（公告）日： | 2014-07-02 |
| 發明（設計）人： | 王敏;王磊;王來友;馮露 | 申請（專利權）人： | 南開大學 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津市杰盈專利代理有限公司 12207 | 代理人： | 朱紅星 |
| 地址： | 300457 天津市塘*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 克羅諾 桿菌 抗原 特異 核苷酸 及其 應用 | ||
1.一種對克羅諾桿菌O抗原基因特異的核苷酸，其特征在于所述核苷酸為：
SEQ?ID?NO:1-12所示的核苷酸中的至少一種
與SEQ?ID?NO:1-12所示的核苷酸互補的核苷酸中的至少一種。
2.一種PCR試劑盒，包括PCR引物、dNTP、緩沖液和DNA聚合酶，所述PCR引物如權利要求1所述SEQ?ID?NO:1-12所示核苷酸中的至少一種。
3.權利要求2所述的試劑盒，還包括如下試劑：?
10?mM?dNTP??30μL；???????????10×酶特異性反應緩沖液50μL；
5?U/μL?耐熱DNA聚合酶?5μL；引物1（10μM）?10μl
引物2（10μM）10μl??????????陽性對照品10μL，
陰性對照品10μL；??????????????ddH2O?5mL。
4.權利要求1所述核苷酸在制備用于檢測克羅諾桿菌PCR試劑盒和/或基因芯片中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于所述的PCR試劑盒里的引物如SEQ?ID?NO:1-12所示的核苷酸中的至少一種。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于所述的基因芯片為微列陣芯片。
7.權利要求4所述的應用，其中所述的PCR試劑盒檢測檢測克羅諾桿菌的方法按以下步驟進行：
?取2～5μl擴增產物與6×溴酚藍上樣緩沖液以5：1的體積比混合；
?將混合液上樣于1.2％的瓊脂糖凝膠上；
?將瓊脂糖凝膠電泳120v穩壓電泳約10分鐘，用DL2000?Marker進行對照；
?觀察并記錄結果；
⑤分析結果并進行判斷。
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