[發明專利]巴利森苷對照品的制備方法

有效

• 申請號: 201410150002.9
• 申請日: 2014-04-15
• 公開（公告）號: CN103896999A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 周英;陳琳;郭豐敏;聶昌平;彭禮軍
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C07H1/08
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

1.一種巴利森苷對照品的制備方法，其特征在于：包括以下步驟

1）將天麻粉加入質量百分比為70%的乙醇中，回流提取溫度75℃～80℃，過濾提取液；將提取液進行減壓濃縮回收酒精，向濃縮液中加入石油醚萃取脫脂，萃取至萃取液無色透明，分離的水層用大孔吸附樹脂層析柱分離，用乙醇-水梯度洗脫，洗脫梯度為純水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、乙醇，收集20%乙醇部分，再經硅膠柱層析分離，以氯仿-甲醇梯度洗脫，氯仿：甲醇為50:1～1:1，V:V，在氯仿與甲醇的體積比為3:1的洗脫部分獲得巴利森苷粗品;

2）將巴利森苷粗品用色譜甲醇溶解后，經制備液相色譜分離純化，流動相為乙腈-水，乙腈與水的體積比為15:85，色譜柱為C₁₈反相硅膠柱，流速15mL/min，柱溫25℃，收集液經冷凍干燥后，獲得白色粉末狀結晶，即為巴利森苷對照品。

2.根據權利要求1所述的巴利森苷對照品的制備方法，其特征在于：天麻粉與乙醇的料液比為1:10～20?。

3.根據權利要求1所述的巴利森苷對照品的制備方法，其特征在于：回流提取為3次，3次提取的時間依次為3小時、3小時及2小時，合并3次提取液。

4.根據權利要求1所述的巴利森苷對照品的制備方法，其特征在于：減壓濃縮的壓力為0.05MPa，溫度為75℃，濃縮時間為45min。

5.根據權利要求1所述的巴利森苷對照品的制備方法，其特征在于：向濃縮液中加入石油醚萃取脫脂時，濃縮液與石油醚的體積比為1:3，反復萃取5～8次。