[發明專利]一株產環糊精葡萄糖基轉移酶的嗜熱脂肪地芽孢桿菌菌株

有效

• 申請號: 201410148657.2
• 申請日: 2014-04-15
• 公開（公告）號: CN103981125A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 林新堅;陳濟琛;賈憲波;林戎斌;林陳強
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院土壤肥料研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/10;C12R1/01
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種嗜熱脂肪地芽胞桿菌菌株，其特征在于：所述菌株為嗜熱脂肪地芽胞桿菌菌株（Geobacillus?caldoxylosilyticus）CHB1，該菌株已于2013年8月28日在中國典型培養物菌種保藏中心登記保藏，保藏編號為CCTCC?M?2013384。

2.一種如權利要求1所述一種嗜熱脂肪地芽胞桿菌菌株生產環糊精葡糖基轉移酶的制備方法，其特征在于：其液體發酵粗酶液制備方法的具體步驟為：

（1）嗜熱脂肪地芽孢桿菌CHB1的活化：用接種環將嗜熱脂肪地芽孢桿菌CHB1劃線于菌株活化培養基上，并于恒溫培養箱中培養18?h～24?h?，并且培養溫度為60℃～65℃?；

（2）制備種子液：將步驟（1）所獲得的嗜熱脂肪芽孢桿菌CHB1的單菌落接種于50?mL的種子培養基中，并將其置于恒溫振蕩搖床中培養18?h～24?h，溫度60℃～65℃，轉速180?rpm/min；

（3）發酵粗酶液：按2?%移種量將步驟（2）所獲得的種子液轉入已消毒滅菌的產酶培養基中培養，溫度60?℃～65℃，轉速180?rpm/min，培養時間為48?h；

（4）環糊精葡萄糖基轉移酶粗酶液的制備：將步驟（3）所獲得的液體發酵液10000?g超速離心10?min，上清即為粗酶液。

3.根據權利要求2所述一種嗜熱脂肪地芽胞桿菌菌株生產環糊精葡糖基轉移酶的制備方法，其特征在于：所述菌種活化培養基的組分：牛肉浸膏0.5?%，大豆蛋白胨0.9?%，磷酸氫二鉀0.1?%，磷酸二氫鉀0.75?%，瓊脂粉1.6?%，蒸餾水配制，pH?7.2；

所述種子培養基的組分：牛肉浸膏0.5?%，大豆蛋白胨0.9?%，磷酸氫二鉀0.1?%,磷酸二氫鉀0.75?%，蒸餾水配制，pH?7.2；

所述產酶培養基的組分：糊精1?%，牛肉膏0.3?%，大豆蛋白胨0.5?%，CaCl₂?0.2?%，K₂HPO_4?0.2?%，KH₂PO_4?0.2?%，MgSO₄·7H₂O?，FeSO_4?0.2?%，蒸餾水配制，pH?7.0。