[發明專利]一種模擬移動床色譜從丹參粗提物中提純丹參酮IIA的方法

有效

• 申請號: 201410148599.3
• 申請日: 2014-04-14
• 公開（公告）號: CN103936816A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發明（設計）人: 王紹艷;魏伯峰;李守江;張園;齊婷;洪鶴員
• 申請（專利權）人: 遼寧科技大學
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00
• 代理公司: 鞍山嘉訊科技專利事務所 21224
• 代理人: 張群

技術領域

本發明涉及天然植物有效組分的提純方法，尤其是一種三帶模擬移動床色譜提純丹參酮IIA的的方法。

背景技術

丹參酮IIA是丹參的有效成分之一，具有非常廣闊的臨床應用前景，除了傳統的活血調經、祛瘀止痛、養心安神之功效外，近年藥理研究表明丹參酮IIA還具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抑菌、保肝及降低血液粘度、抑制凝血、促進纖溶、抑制血小板聚集、延長血栓形成及促進血栓溶解，調節機體免疫功能，改善抗糖尿病微血管并發癥等藥理活性（時珍國醫國藥.2010，21：7，1770-1772）。

丹參酮IIA是丹參的脂溶性成分。除丹參酮IIA之外，丹參的脂溶性成分中還有其它的丹參酮型的二萜類化合物，如：丹參酮I、丹參酮IIB、隱丹參酮、羥基丹參酮、丹參羥甲酯、二氫丹參酮I，以及異丹參酮I、異丹參酮II、異隱丹參酮、二氫異丹參酮I等。

目前，獲得高純度（高于90%）丹參酮IIA單體的主要技術有：超臨界二氧化碳萃取法，高速逆流色譜法，制備液相色譜法。

中國專利公開（公告）號：CN1369485，給出了“一種超臨界二氧化碳萃取精制丹參酮IIA的方法”，采用超臨界CO₂從丹參中萃取丹參酮IIA，一次性進行萃取和分離精制，具有無毒、快速、價廉、低溫操作、符合環保要求等優點，但提取高純度（高于90%）丹參酮IIA單體時，收率低。

高速逆流色譜法不需使用固體填料，應用兩相互不混溶的溶劑系統在支撐管內高速行星運動來分離天然產物，中國專利公開（公告）號：CN1337397，“應用高速逆流色譜分離純化丹參酮的方法”中溶劑體系為正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，經二次HSCCC色譜儀分離后獲得丹參酮IIA，每次分離時間需要5～6小時，分離時間長；中國專利公開（公告）號：CN1394870，“一種分離純化丹參酮的方法”的溶劑體系為石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，采用HSCCC色譜儀，一次分離可得隱丹參酮、丹參酮I和丹參酮IIA，但獲得丹參酮IIA的時間8～9小時，仍很長；Min?Zhang等，在“Development?of?a?strategy?and?process?parameters?for?a?green?process?in?counter-current?chromatography:Purification?of?tanshinone?IIA?and?cryptotanshinone?from?Salvia?miltiorrhiza?Bunge?as?a?case?study”（Journal?of?Chromatography?A,2011,1218:6031–6037）一文中用正己烷-二氯甲烷-甲醇-水，及正己烷-乙醇-水的二次逆流色譜法（CCC）提取丹參酮IIA，分離時間縮短，產品純度高，但收率很低。雖然高速逆流色譜法無不可逆吸附，但或者分離時間長，或者回收率低，效率尚需進一步提高。

在制備液相色譜法中，中國專利公開（公告）號：CN101210041，給出“一種丹參酮ⅡA化學對照品的分離制備方法”，以重量含量50～97%丹參酮IIA提取物為原料，以甲醇-水溶液為洗脫液，以C8或C18鍵合填料為固定相提純丹參酮ⅡA化學對照品；中國專利公開（公告）號：CN1670019，提出的“一種丹參酮的提取方法”將丹參的醇提取液加至大孔吸附樹脂柱上，分別采用一定濃度的醇梯度洗脫，得到提取物中丹參酮IIA；中國專利公開（公告）號：CN101200490，“高純度丹參酮ⅡA的制備方法”主要將丹參總酮原料采用正相層析（以硅膠或氧化鋁為固定相，石油醚/二氯甲烷為流動相），通過多功能層析系統進行分離，洗脫液濃縮，重結晶，得高純度丹參酮IIA。這些柱色譜法都為批處理工藝，洗脫劑耗量大，不能連續自動生產。

模擬移動床色譜在制備色譜的基礎上，引進了連續、逆流、精餾的運行機制，使色譜分離由間歇工作變為連續運行，能夠進行自動化、規模化、高效分離，是提純化合物的有效手段。目前尚未發現模擬移動床色譜技術分離提純丹參酮IIA的報道。

發明內容

本發明提供了一種三帶模擬移動床色譜提純丹參酮IIA的方法，可以連續、自動、高效地提純丹參酮IIA。

本發明提供的一種三帶模擬移動床色譜提純丹參酮IIA的方法，利用模擬移動床色譜簡稱SMBC從丹參粗提物中提純丹參酮IIA，該方法的內容如下：

（1）SMBC設備

包括3～10根色譜柱、洗脫帶流動相輸送泵、精制帶流動相輸送泵、進料液輸送泵、閥、多通、連接管線和儲液罐；

色譜柱的固定相使用十八烷基硅烷鍵合硅膠ODS，10～60μm；