[發明專利]一種測定原花青素含量及鑒別的方法

無效

• 申請號: 201410146549.1
• 申請日: 2014-04-12
• 公開（公告）號: CN103954700A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 秦蓉;王讓成;李苗鴿;錢英;王濤;任靜;孫蕊艷;萇釗;翟巧麗
• 申請（專利權）人: 陜西衡道檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 云南派特律師事務所 53110
• 代理人: 龔筍根

1.一種測定原花青素含量的方法，其特征在于：

（1）試樣溶液制備：稱取50-100mg試樣置于50mL容量瓶中，加入30mL甲醇，以40KHz超聲處理20min，放冷至室溫后，加甲醇至刻度，搖勻，以4000r/min離心后取上清液，即試樣溶液；

（2）標準曲線的繪制：精密稱取原花青素標準品B₂（≥99%）10mg，溶于10mL甲醇中，分別吸取該溶液0mL、0.1mL、0.25mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL置于具塞錐瓶中，采用與試樣相同的測定方法測吸光度，以濃度(mg/mL)為橫坐標、吸光度為縱坐標制標準曲線；

（3）試樣測定：將正丁醇與鹽酸按95：5的體積比混合后，取出6mL置于具塞容器中，再加入0.2mL硫酸鐵銨溶液和1mL試樣溶液，混勻，置98-100℃沸水浴回流，精確加熱40min后，立即置2-10℃冷水中冷卻15min后，于546nm波長處測吸光度，用標準曲線計算試樣中原花青素的含量。

2.一種利用權利要求1所述測定方法鑒別物料中原花青素的方法，其特征在于：包括以下步驟：以乙腈作為流動相添加劑，通過梯度洗脫，實現原花青素試樣的鑒別，具體步驟如下：

①標準樣品溶液制備：稱取樣品200mg置于50mL容量瓶中，加入分析純甲醇40mL，以40KHz超聲振蕩30min后冷卻至室溫定容，用微孔濾膜過濾后進樣測定；

②溶液制備：稱取樣品200mg置于50mL容量瓶中，加入分析純甲醇40mL，以40KHz超聲振蕩30min后冷卻至室溫定容，用0.45μm微孔濾膜過濾后進樣測定；

③色譜條件：色譜柱：PRP-125cm×4.6mm×5μm，

流動相A：分析純乙腈

流動相B：0.3%磷酸水溶液

時間(min)045656685流動相A1020601010流動相B9080409090

流速：1ml/min

檢驗波長：278nm

柱溫：室溫

進樣量：5μL。

3.如權利要求2所述測定方法鑒別物料中原花青素的方法，其特征在于：所述微孔濾膜孔徑為0.45μm。