[發(fā)明專利]一種食品中磷脂酰絲氨酸含量的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410145181.7
• 申請(qǐng)日: 2014-04-11
• 公開（公告）號(hào): CN103884813A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 石丹;王曉彥;劉彪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/14
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 趙曉丹

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品檢測(cè)領(lǐng)域。更具體地，涉及一種食品中磷脂酰絲氨酸含量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

磷脂酰絲氨酸（簡(jiǎn)稱ps）是一種磷脂類物質(zhì)，對(duì)人的腦部神經(jīng)系統(tǒng)健康具有重要作用。目前，可以將ps作為食品原料添加到食品中服用，或者作為保健食品服用。當(dāng)ps作為保健食品服用時(shí)，由于純度高，含量高，使用一般的高效液相色譜法即可檢測(cè)，不需要復(fù)雜的前處理技術(shù)，而當(dāng)ps作為普通食品原料添加到食品中時(shí)，其添加量一般較少，在食品中受其他原料的干擾不易檢測(cè)，尤其是以蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等物質(zhì)為主的食品中，由于蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等物質(zhì)會(huì)對(duì)ps起到一定的包埋作用，使ps不易于從這些物質(zhì)中分離，從而影響ps的檢測(cè)。

由于ps的功效被人們廣泛認(rèn)可，越來(lái)越多的食品中添加了ps，探索建立有效檢測(cè)食品中磷脂酰絲氨酸含量的新方法對(duì)于食品原料的監(jiān)測(cè)具有更加重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種食品中磷脂酰絲氨酸含量的檢測(cè)方法。該方法利用特殊的分離提取技術(shù)使得磷脂酰絲氨酸幾乎可以全部從食品原料的干擾物質(zhì)中提取出來(lái)，方法的回收率高、重現(xiàn)性好，操作簡(jiǎn)單，為磷脂酰絲氨酸在食品中的規(guī)模化使用提供了技術(shù)支持。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種食品中磷脂酰絲氨酸含量的檢測(cè)方法，該方法包括以下步驟：

（1）稱取待測(cè)食品，配制成樣品水溶液，用三氯甲烷和甲醇的混合溶液進(jìn)行萃取，然后過(guò)濾，將濾液蒸干；

（2）用三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液對(duì)步驟（1）得到的蒸干物質(zhì)進(jìn)行萃取，然后過(guò)濾，濾液靜置分層；

（3）取下層溶液進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)。

上述方法中，所述食品包括固態(tài)制品和液態(tài)制品。由于不同食品中磷脂酰絲氨酸的添加量差別較大，配制樣品水溶液時(shí)，為了檢測(cè)方便，優(yōu)選地控制樣品水溶液中磷脂酰絲氨酸的濃度為0.1mg/mL-5mg/mL，更優(yōu)選為0.1mg/mL-1.5mg/mL。

進(jìn)一步地，步驟（1）中，所述三氯甲烷和甲醇的混合溶液中，三氯甲烷與甲醇的體積比為1-10，優(yōu)選為2.5-5。用三氯甲烷和甲醇的混合溶液對(duì)樣品水溶液進(jìn)行萃取時(shí)，所述三氯甲烷和甲醇的混合溶液與樣品水溶液的體積比至少大于10。此外，萃取的時(shí)間和溫度對(duì)于ps萃取率也有影響，通常在15℃-70℃條件下萃取15min-5h，優(yōu)選為在35℃-50℃條件下萃取30min-2h。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，步驟（1）中將濾液蒸干采用的是旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。

進(jìn)一步地，步驟（2）中，所述三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液的配制方法為：按照三氯甲烷與甲醇的體積比為1-3的比例配制成三氯甲烷和甲醇的混合溶液，然后按照三氯甲烷和甲醇的混合溶液與水的體積比為1-3的比例配制成三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液。用三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液對(duì)蒸干物質(zhì)進(jìn)行萃取時(shí)，三氯甲烷、甲醇和水的混合溶液的用量只要可以將蒸干物質(zhì)充分溶解即可。

本發(fā)明通過(guò)兩步萃取有效地去除了食品中的干擾物質(zhì)，通過(guò)常規(guī)的高效液相色譜就可以完成食品中的磷脂酰絲氨酸的含量檢測(cè)。為了使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地實(shí)施本發(fā)明，在此提供一種優(yōu)選的高效液相色譜檢測(cè)方法，具體如下：

高效液相色譜的檢測(cè)條件為：采用LiChrosphere100diol色譜柱，流動(dòng)相由A相和B相組成，進(jìn)行梯度洗脫，流速1.5mL/min，柱溫25℃-30℃，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，其中，所述A相為n-正己烷:2-丙醇:乙酸:三乙胺的體積比為820:170:10:0.8，B相為2-丙醇:純水:乙酸:三乙胺的體積比為850:140:10:0.8。

優(yōu)選的梯度洗脫條件為：0-23min，流動(dòng)相中A相的體積濃度從95%降至60%，B相的體積濃度從5%升至40%；23-28min，流動(dòng)相中A相的體積濃度從60%降至0，B相的體積濃度從40%升至100%；28-39min，流動(dòng)相中A相的體積濃度從0升至95%，B相的體積濃度從100%降至5%；39-50min，流動(dòng)相中A相的體積濃度為95%，B相的體積濃度為5%。

根據(jù)上述檢測(cè)條件，對(duì)前處理后的樣品，即步驟（2）中獲得的下層溶液，進(jìn)行檢測(cè)。一般情況，檢測(cè)前還要使用三氯甲烷或甲醇定容，在高效液相色譜中獲取磷脂酰絲氨酸的峰面積，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線校正方程計(jì)算磷脂酰絲氨酸的濃度。