[發(fā)明專利]羧甲基葡聚糖在制備提高禽流感疫苗抗體陽性率藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410143946.3
• 申請日: 2014-04-10
• 公開（公告）號: CN103948622A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫英峰;李秀麗;田向?qū)W;李富強;任衛(wèi)科;鄢明華;張莉;楊春蕾;刁澤惠;楊鴻雁;王利麗;路超
• 申請（專利權(quán)）人: 天津市畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: A61K31/716
• 分類號: A61K31/716;A61K39/145;A61P37/04;A61P31/16
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉羧甲基葡聚糖，具體來說涉及羧甲基葡聚糖在制備提高禽流感疫苗抗體陽性率藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，滅活疫苗在畜禽疫病防控中發(fā)揮重要作用，但現(xiàn)有滅活疫苗免疫機體后，普遍存在抗體陽性率較低，抗體持續(xù)期較短等問題。一般常規(guī)滅活疫苗需要免疫兩次以上，且免疫后2-3?周才能對機體提供有效保護。在規(guī)?；B(yǎng)殖條件下，因畜禽免疫后抗體陽性率較低，無法提供有效保護，可能會波及整群發(fā)病，帶來嚴重經(jīng)濟損失。

禽流感是危害我國養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展重要傳染病之一，免疫滅活疫苗是防控這種疾病有效措施之一。目前，由于雞群免疫抑制疾病發(fā)病率較高，禽流感疫苗免疫后抗體陽性率普遍較低，特別是在肉雞上體現(xiàn)尤為明顯。某些肉雞飼養(yǎng)場，H5亞型禽流感抗體陽性率為0，存在嚴重的免疫缺陷。另外，肉雞生長期比蛋雞短，且免疫性能方面比蛋雞略差，在母源抗體消失至免疫后自身產(chǎn)生有效保護抗體需要一段時間，同時肉雞生產(chǎn)期只有40多天，對疫苗的免疫效力要求更高。因此，臨床生產(chǎn)上亟需一種能提高現(xiàn)有禽流感滅活疫苗抗體效價的藥物，以提高現(xiàn)有滅活疫苗對肉雞的保護。

羧甲基葡聚糖是酵母葡聚糖的羧甲基化衍生物，是一種新型高效、無毒、水溶性生物大分子，它具有廣泛的生理調(diào)節(jié)作用。例如1）促進傷口愈合：研究發(fā)現(xiàn)使用羧甲基葡聚糖涂抹動物腿部傷口，能明顯加速其傷口愈合。2）曬后修復(fù)：研究發(fā)現(xiàn)羧甲基葡聚糖能夠快速修復(fù)因紫外照射導(dǎo)致的皮膚紅斑。3）抗衰老：皮膚中具有免疫活性的朗格罕氏細胞能夠被羧甲基葡聚糖活化，誘發(fā)其系統(tǒng)的免疫和修復(fù)功能。羧甲基葡聚糖已被列入國際化妝品原料名單（INCI），廣泛應(yīng)用化妝品領(lǐng)域，然而，尚未有關(guān)于羧甲基葡聚糖提高禽流感疫苗抗體陽性率的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了羧甲基葡聚糖在制備提高禽流感疫苗抗體陽性率藥物中的應(yīng)用。它是將羧甲基葡聚糖與礦物油乳化成油乳劑后，按照一定比例與商品疫苗混合后注入畜禽機體內(nèi)。其中所述的提高禽流感疫苗抗體陽性率指的是提高肉雞H5亞型禽流感疫苗抗體的陽性率。?

本發(fā)明所述的羧甲基葡聚糖指的是含有羧甲基葡聚糖的油乳劑型免疫增強劑。特別是應(yīng)用于家禽時，在制備的油乳劑型免疫增強劑中羧甲基葡聚糖最終濃度為5g/100mL。

本發(fā)明所述的羧甲基葡聚糖，指的是含有羧甲基葡聚糖的油乳劑型免疫增強劑。

本發(fā)明進一步公開了油乳劑型免疫增強劑，它是由下述重量份數(shù)的原料組成：

羧甲基葡聚糖?????10g????????????????????吐溫-80????2mL???????????????

白油????????????????94mL???????????????????司班-80????6mL

注射用水?????????100mL。

本發(fā)明同時也公開了油乳劑型免疫增強劑的制備方法按如下的步驟進行：

（1）配制水相溶液：將10g羧甲基葡聚糖加入100mL注射用水中溶解，然后加入吐溫-80?2mL，200rpm攪拌10min，配制成水相溶液。

（2）配制油相溶液：白油與司班-80?混合配制成油相溶液；其中白油：司班-80的體積比比為100:6。

（3）將配制的水相溶液緩慢加到油相溶液中，然后在24?000?r/min?乳化?10?min，即得羧甲基葡聚糖油乳劑；其中水相溶液與油相溶液的體積比1:1。

本發(fā)明更進一步公開了油乳劑型免疫增強劑使用方法，它是將油乳劑型免疫增強劑與商品禽流感滅活疫苗按體積比1∶9混合后注入動物機體。該羧甲基葡聚糖油乳劑能顯著提高H5亞型禽流感商品疫苗抗體抗體陽性率，且高達100%。

本發(fā)明更加詳細的試驗方法及結(jié)果如下：

1?材料和方法

1.1?疫苗和檢測試劑盒

H5（Re-5）亞型禽流感商品疫苗，購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司。禽流感抗體ELISA檢測試劑盒，購自美國愛德士（IDEXX）試劑公司。

1.2?試驗動物

1日齡肉雞購自天津靜?？h某肉雞養(yǎng)殖場，在普通環(huán)境中飼養(yǎng)。

1.3?油乳劑免疫增強劑配制及使用方法

（1）配制水相溶液：在注射用水中分別加入不同克數(shù)羧甲基葡聚糖，然后加入2%吐溫-80，200rpm攪拌，10min，配制成水相溶液，使其終濃度分別為；50g/100mL，5g/100mL，0.5g/100mL。

（2）配制油相溶液：94%?白油與6%?司班-80?混合配制成油相溶液。