[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于IgA腎病檢測(cè)的系統(tǒng)、方法及方法的建立

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410143612.6
• 申請(qǐng)日: 2014-04-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104975075B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡廣研;陳香美;段智宇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6883
• 代理公司: 北京東方匯眾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11296
• 代理人: 張淑賢

本發(fā)明公開(kāi)了一種用于IgA腎病檢測(cè)的系統(tǒng)、方法及方法的建立，其中，所述建立方法包括：S10、采集IgA型腎病患者、非IgA型腎病的腎病患者以及健康者的尿液；S20、檢測(cè)尿液中miRNA的表達(dá)量；S30、利用2^?ΔΔct相對(duì)定量法比較所述miRNA的表達(dá)量；S40、對(duì)所述miRNA的表達(dá)量進(jìn)行ROC曲線分析。本發(fā)明的檢測(cè)樣本是尿液，而不是腎組織，最明顯的優(yōu)勢(shì)就是具有無(wú)創(chuàng)傷檢測(cè)的特點(diǎn)，由于檢測(cè)時(shí)無(wú)明顯禁忌癥，可以適用于所有患者的檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)療診斷技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種用于IgA腎病檢測(cè)的系統(tǒng)、方法及方法的建立。

背景技術(shù)

目前，IgA腎病診斷的主要的檢測(cè)方法是腎活檢，特征是腎小球系膜區(qū)IgA團(tuán)塊樣或顆粒樣沉積，腎活檢時(shí)患者呈俯臥位，穿刺針在超聲的引導(dǎo)下于患者背部進(jìn)針，快速取出腎組織，在一系列固定和染色后在光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡下觀察腎臟變化情況，以診斷腎病類(lèi)型和判斷預(yù)后，但腎活檢存在著至少下列所述的技術(shù)缺點(diǎn)：

1、腎活檢為創(chuàng)傷性檢查，在早期患者尿常規(guī)正常的情況下，不推薦進(jìn)行腎活檢。在患者病情加重需要重新評(píng)估腎臟病理時(shí)，多次穿刺不僅加重腎損傷，還有合并出血、感染等并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)，難以反復(fù)進(jìn)行。

2、腎活檢有許多禁忌癥。如絕對(duì)禁忌癥、出血傾向明顯、重度高血壓、精神病或不配合者、孤立腎、小腎等；相對(duì)禁忌癥，腎臟感染呈活動(dòng)期（如活動(dòng)性腎盂腎炎、腎結(jié)核、腎膿腫）、腎腫瘤或腎動(dòng)脈瘤、多囊腎、過(guò)度肥胖、慢性腎功能衰竭、重度腹水、心功能衰竭、妊娠等。因此，不是每個(gè)腎臟病患者都適合做腎活檢檢查。

3、腎活檢還有許多的并發(fā)癥。最常見(jiàn)的如血尿，腎周?chē)撃[，腰痛及腰部不適，發(fā)熱，動(dòng)靜脈瘺等。

4、腎活檢從準(zhǔn)備穿刺到得到病理結(jié)果耗時(shí)較長(zhǎng)，準(zhǔn)備步驟較多，反應(yīng)較慢。由于是有創(chuàng)檢查，患者需要術(shù)前停用抗凝藥，對(duì)于有心血管疾病必須長(zhǎng)期使用抗凝藥的患者不利，且患者術(shù)后必須躺在床上24小時(shí)絕對(duì)臥床，不得下床走動(dòng)。而從穿刺出腎組織到固定、石蠟包埋、免疫組化染色，直到最后顯微鏡下觀察得出病理結(jié)果，一般需要5-7天時(shí)間，對(duì)于進(jìn)展較快的急進(jìn)性腎小球腎炎等腎病往往會(huì)造成診斷不及時(shí)，錯(cuò)診或漏診的情況時(shí)有發(fā)生。

因此，目前IgA腎病的診斷技術(shù)有待進(jìn)一步改進(jìn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是建立一種用于IgA腎病檢測(cè)方法，旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中的檢測(cè)時(shí)對(duì)機(jī)體創(chuàng)傷大、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、適用范圍小、檢測(cè)步驟復(fù)雜的技術(shù)問(wèn)題。

本發(fā)明的另外一個(gè)目的是提供一種用于IgA腎病檢測(cè)方法，旨在提供一種無(wú)機(jī)體創(chuàng)傷、檢測(cè)時(shí)間短、適用范圍大、檢測(cè)步驟簡(jiǎn)單的IgA腎病檢測(cè)方法。

本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供一種用于IgA腎病檢測(cè)的系統(tǒng)，旨在提供一種適用于無(wú)機(jī)體創(chuàng)傷、檢測(cè)時(shí)間短、適用范圍大、檢測(cè)步驟簡(jiǎn)單的IgA腎病檢測(cè)方法的系統(tǒng)。

本發(fā)明提出了一種用于IgA腎病檢測(cè)方法的建立，包括：

S10、采集IgA型腎病患者、非IgA型腎病的腎病患者以及健康者的尿液；

S20、檢測(cè)尿液中miRNA的表達(dá)量；

S30、利用2^-ΔΔct相對(duì)定量法比較所述miRNA的表達(dá)量；

S40、對(duì)所述miRNA的表達(dá)量進(jìn)行ROC曲線分析。

可選的，所述miRNA為miRNA-25、miRNA-144以及miRNA-486中的至少一種。

可選的，檢測(cè)miRNA-25、miRNA-144以及miRNA-486的表達(dá)量是通過(guò)選自熒光定量PCR、Taqman探針以及LightCycle探針中的至少一種方法進(jìn)行的。

可選的，所述熒光定量PCR為SYBR Green熒光定量PCR。