[發明專利]山藥多糖的分離純化方法

有效

• 申請號: 201410143035.0
• 申請日: 2014-04-10
• 公開（公告）號: CN103910809A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 于平;楊衛芳
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 黎雙華;向慶寧

技術領域

本發明屬于食品領域，特別涉及提取、純化山藥多糖的方法。?

背景技術

在過去幾年，多糖的研究是食品、化學、生物領域研究的熱點，隨著人們對多糖功能的不斷了解，尤其是對多糖的分離、純化，活性分析以及結構鑒定有了長足的進步，也對多糖的生物學性能有了新的認識。但是，多糖的研究仍任重道遠?？梢哉雇?，多糖的研究仍將成為生物學、藥物學、食品科學不可或缺的部分。?

山藥為薯蕷科薯蕷屬植物薯蕷的干燥的根莖，是我國傳統的藥食同源的作物之一。主要產于河南，湖南、湖北、江西等省區亦有生產。根莖略呈圓柱形，長15-30cm，直徑1.5-6cm，表面黃白色或淡黃色，有縱皺紋及須根痕。質堅實，斷面白色，粉質。味微酸，帶粘性。本品性平，味甘。山藥是一年生或多年生纏繞性藤本植物，能形成肥大的地下肉質塊莖供食用或藥用，營養價值很高。以焦作一帶出產的山藥品質最好、藥效最高，又稱為懷山藥。是良好的滋補強壯劑，對腎脾病、糖尿病、慢性腸炎等有輔助的療效，在我國也是重要的出口的特產蔬菜之一。李時珍在《本草綱目》中將其功用概括為：“益腎氣，健脾胃，止泄痢，化痰生，潤皮毛?！庇糜谥委熎⑻撌成佟⒕脼a不止、慢性腸炎、肺虛喘咳、腎虛遺精、慢性腎炎、糖尿病、遺尿、白帶等病癥。山藥主要含有蛋白質、糖類、維生素、脂肪、膽堿和淀粉酶等成分，并含有碘、鈣、鐵和磷等人體不可缺少的微量元素，具有很高的營養價值及藥用價值，是養生健身的佳品，深得世人喜愛。?

如今，山藥多糖具有的廣泛生物活性已逐漸被人們認知，其獨特活性和來源的天然性在保障人體健康的應用中具有很大的潛力。此外，我國山藥資源豐富，應用歷史悠久，因此，具有巨大的開發前景。但是，我國山藥的開發主要以粗加工為主，例如山藥干、山藥精粉等。或是作食療藥膳，被制成糕點、粥等食品。山藥精制產品很少，若能將山藥多糖高效地提取出來并制成相應的保健膠囊，這將大大地提高山藥相關產品的附加值。?

目前，對山藥多糖的研究主要集中在提取、分離方法的研究和簡單的單糖組成分析，而對其進一步的結構分析研究不夠深入。因此，進一步優化山藥多糖提取條件，提高多糖產品純度，剖析山藥多糖的結構并應用于山藥多糖相關產品的研發，將有效促進山藥多糖產品的現代化進程。建立操作簡單，可行的提取純化工藝，降低山藥多糖提取和生產成本，對山藥相關食品企業、醫藥領域都具有重要的現實以及經濟意義。?

發明內容

本發明的目的在于提供山藥多糖的提取和純化工藝，并鑒定了其結構，研究了其抗氧化及抗菌活性。本發明對于應用于山藥多糖相關產品的研發，有效促進山藥多糖產品的現代化進程具有重要意義。?

本發明采用如下技術方案：?

山藥多糖的分離純化方法，其特征在于，包括以下步驟：?

（1）前處理：將新鮮山藥洗凈，切片，50℃下烘箱中干燥，干燥后的山藥片用粉碎機粉碎成山藥粉；?

（2）熱水水浴浸提：在步驟（1）所得山藥粉中加入水，使料水比為1:8.59g/ml，在pH值為8.9、提取溫度76.79℃條件下，提取1.38h得提取液，提取液離心后取上清液；?

（3）Sevage法除蛋白：采用6次Sevage法去除步驟（2）所得上清液中的蛋白質；?

（4）采用高速逆流色譜法進行粗分多糖：以12.5%PEG1000，8%KH₂PO₄、8%K₂HPO₄、71.5%H₂O作為高速逆流色譜分離山藥多糖的溶劑系統；色譜條件為：轉速700r/min，流速2.5mL/min；?

（5）SephadexG-100層析柱進一步純化：層析柱大小為1.0×100cm，色譜條件為：以水作為流動相，上樣濃度3mg/mL，洗脫流速為0.2mL/min，收集洗脫液，得山藥多糖產品。?

進一步地，步驟（1）中山藥切片后加入護色劑護色30min，所述護色劑為含有1.5%檸檬酸、0.75%亞硫酸鈉和1.5%氯化鈉的水溶液。?

步驟（2）中提取液8000r/min離心15min。?

本發明多糖的具體分離方法如下：取自浙江的山藥，利用多糖為生物大分子，較難溶于冷水，可溶于熱水且不溶于一般的有機溶劑的特點，在pH8.9，提取時間1.38h、提取溫度76.79℃、料水比1:8.59g/ml的條件下，獲取到最高山藥得率，且經過響應面優化提取條件后得到的理論得率為5.88%。?