[發明專利]中藥骨碎補黃酮羧甲基衍生物制備方法和臨床應用

無效

• 申請號: 201410142875.5
• 申請日: 2014-04-02
• 公開（公告）號: CN103919820A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 郭宏昌
• 申請（專利權）人: 郭宏昌
• 主分類號: A61K36/11
• 分類號: A61K36/11;A61P19/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于醫學臨床用藥，具體說是涉及一種適用于骨質疏松的治療與預防的藥物。

背景技術

骨質疏松癥(OP)是以骨量減少、骨組織顯微結構發生退行性改變為特征，導致骨脆性增加及骨折發生率增高的全身性疾病，其最大危害是并發骨折。資料表明，美國現有1500～2000萬OP患者，每年約有600萬人因骨質疏松而引起自發性骨折，其中近500萬是絕經期婦女。一般認為，在我國50歲以內人群中，OP發病率為15％～50％，60歲以上老年人OP發生率為56％，而并發骨折者高達12％。目前全世界患OP總人數超過2億，是位居第6位的常見病、多發病。因此，該病已越來越受到臨床醫生的重視。(冀依骨質疏松藥物治療概述【D】天津藥學，2004，16(2)：683-684.)

原發性骨質疏松癥嚴重影響著絕經期婦女和老年人群的生活質量，對其常規治療藥主要有三大類，第一類為促骨礦化劑，包括鈣劑和維生素D；第二類為骨吸收抑制劑，涵概雙膦酸鹽，依普黃酮、雌激素或選擇性雌激素受體調節劑，降鈣素；第三類為骨形成促進荊，如氟化物.甲狀旁腺激素等，三類藥物在骨質疏松癥亞型的治療中各具優勢，聯合治療相得益彰，成為臨床應用的一線和首選藥。但是這些藥物價錢昂貴，而且有副作用。

骨碎補(Drynariae?Rhizoma)為水龍骨科植物槲蕨的干燥根莖，是著名的骨傷科常用中藥。其性溫，味苦歸腎、肝經，具有療傷止痛，補腎強骨，外用消風祛斑的功效。臨床上用于治療跌撲閃挫，筋骨折傷，腎虛腰痛，筋骨痿軟，耳鳴耳聾，牙齒松動；外治斑禿，白癜風。據現代研究，骨碎補中的黃酮類化合物是其主要活性成分，有促進骨折愈合、防治骨質疏松、抗氧化、調血脂、抗炎、鎮痛等生物活性。骨碎補的黃酮類化學成分4個化合物，分別為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、北美素、柚皮素、山奈酚。(陳宏斌，張東.骨碎補黃酮類活性化學成分的研究，陜西中醫學院學報[j]，2012，35(5)：96-97)

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于骨質疏松的治療和預防的骨碎補黃酮提取物衍生物的制備方法。

本發明的優點是制備方法制備簡單，且易溶于水，治療效果好，原料來源廣，成本低廉，無副作用。

本發明的目的可通過下述技術措施來實現：骨碎補-干燥-粉碎-乙醇提取-提取液離心過濾-減壓蒸餾除去乙醇-濃縮-干燥-全乙酰化反應

骨碎補黃酮的提取：骨碎補80℃干燥5h，取出粉碎成細粉，過80目篩，精密稱取骨碎補粉末30g，加人300mL95％乙醇，水浴回流，提取2次，每次2h，過濾，濾液合并，減壓蒸餾回收溶劑至少量，提取液經過減壓濃縮，真空干燥后得到黃色固體，即為骨碎補黃酮提取物，收率約3％。

骨碎補黃酮衍生物制備：

按每100g骨碎補黃酮加入200-250ml(2mol/L)的氫氧化鈉液體和15g一氯乙酸混合均勻，35℃下攪拌0.5h；然后按每100g骨碎補黃酮再加入一氯乙酸20g與氫氧化鈉20g的混合物，在70-80℃條件下攪拌反應3h，反應產物經濃縮后，用95％乙醇洗滌，沉淀24h，得到骨碎補黃酮衍生物，生成物干燥。

所述的藥物組合物，在制備促進人骨質疏松的治療和預防中的應用。

為了進一步的驗證本發明成品制劑的療效，我們將上述具體制備方法中制備的藥物進行了相應的動物試驗，現將結果報告如下。

目的：探討骨碎補黃酮衍生物對骨質疏松的治療的影響，有效地開發中藥骨碎補黃酮提供實驗依據.

方法：

動物分組及模型制備：取6月齡清潔級雎性SD大鼠30只。體重約261±12g。隨機分為治療組、對照組2組，每組15只大鼠。兩組大鼠均于每日上午灌服維甲酸75mg/kg，連續灌胃15d造成骨質疏松模型。

給藥方法：在大鼠造模的同時，實施灌胃給藥，治療組大鼠予骨碎補黃酮衍生物10mg/kg/d，對照組大鼠予灌胃等體積的生理鹽水。續灌胃21d，并于最后一次給藥后12h處死全部大鼠.

標本采集與組織學處理：取大鼠股骨做組織學制備。每組標本隨機抽取5個骨折斷端進行脫鈣石蠟切片。股骨用4％PFA加0.1M磷酸緩沖液調整PH值為7.2，室溫固定3d。然后用20％EDTA加0.1M磷酸緩沖液調整PH值為7.2，浸泡8～10d脫鈣。再經系列乙醇脫水，石蠟包埋，沿股骨干長軸方向行厚度切成5μm厚片，行HE染色。隨機取5張股骨片，分別在×400奧林巴斯FV1000放大激光掃描共聚焦顯微鏡下觀察。

結果與結論：