[發明專利]耐熱菌類的檢測方法有效
| 申請號: | 201410141182.4 | 申請日: | 2009-05-28 |
| 公開(公告)號: | CN103923992A | 公開(公告)日: | 2014-07-16 |
| 發明(設計)人: | 細谷幸一;中山素一;德田一;矢口貴志;弘佑介 | 申請(專利權)人: | 花王株式會社 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322 | 代理人: | 龍淳 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 耐熱 菌類 檢測 方法 | ||
1.一種屬于籃狀菌(Talaromyces)屬的耐熱菌類的檢測方法,其包括下述2)的工序,
2)用下述(B-1)或者(B-2)的寡核苷酸作為引物對屬于籃狀菌(Talaromyces)屬的菌類進行鑒定的工序,
(B-1)序列號7~9和73~78中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸;
(B-2)在序列號7~9和73~78中任一個記載的堿基序列中使1~3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于籃狀菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。
2.如權利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
為了進行鑒定,標記從所述(B-1)~(B-2)中選出的至少一種寡核苷酸,使得到的寡核苷酸與從檢測對象物中提取的核酸進行雜交,測定經雜交的寡核苷酸的標記。
3.如權利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
包括下述2-1)的工序:
2-1)用下述(B-3)或者(B-4)的寡核苷酸作為引物通過聚合酶鏈反應(PCR)法對屬于籃狀菌(Talaromyces)屬的菌類進行鑒定的工序,
(B-3)序列號7~9中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸;
(B-4)在序列號7~9中任一個記載的堿基序列中使1~3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于籃狀菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。
4.如權利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
包括下述2-2)的工序:
2)用下述(B-5)或者(B-6)的寡核苷酸作為引物通過環介導等溫擴增(LAMP)法對屬于籃狀菌(Talaromyces)屬的菌類進行鑒定的工序,
(B-5)序列號73~78中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸;
(B-6)在序列號73~78中任一個記載的堿基序列中使1~3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于籃狀菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。
5.如權利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
為了進行鑒定,使用所述(B-1)~(B-2)的寡核苷酸中的至少一種來進行基因擴增,并確認有無擴增產物。
6.如權利要求5所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
采用聚合酶鏈反應(PCR)法進行所述擴增反應。
7.如權利要求5所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
采用環介導等溫擴增(LAMP)法進行所述擴增反應。
8.如權利要求6所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
在所述2)的工序中,使用下述(B-7)的至少一種寡核苷酸對:
(B-7)由序列號7所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸和序列號8所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸構成的寡核苷酸對、或者
由序列號9所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸和序列號8所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸構成的寡核苷酸對。
9.如權利要求7所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
在所述2)的工序中,使用下述(B-8)的寡核苷酸中的至少一種:
(B-8)序列號73~78中任一個所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸。
10.如權利要求9所述的耐熱菌類的檢測方法,其特征在于,
在所述2)的工序中,使用下述(B-12)的寡核苷酸組合:
(B-12)寡核苷酸組合,其包含:序列號73所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、序列號74所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、序列號75所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、以及序列號76所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸。
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