[發(fā)明專利]耐熱菌類的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410140150.2
• 申請日: 2009-05-28
• 公開（公告）號: CN103923989A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設計）人: 細谷幸一;中山素一;德田一;矢口貴志;弘佑介
• 申請（專利權(quán)）人: 花王株式會社
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京尚誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳

1.一種屬于半內(nèi)果菌（Hamigera）屬的耐熱菌類的檢測方法，其包括下述4）的工序，

4）用下述（D-1）或者（D-2）的寡核苷酸作為引物對屬于半內(nèi)果菌（Hamigera）屬的菌類進行鑒定的工序，

（D-1）序列號16～21和51～56中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸；

（D-2）在序列號16～21和51～56中任一個記載的堿基序列中使1～3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于半內(nèi)果菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。

2.如權(quán)利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

為了進行鑒定，標記從所述（D-1）～（D-2）中選出的至少一種寡核苷酸，使得到的寡核苷酸與從檢測對象物中提取的核酸進行雜交，測定經(jīng)雜交的寡核苷酸的標記。

3.如權(quán)利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

包括下述4-1）的工序：

4-1）用下述（D-3）或者（D-4）的寡核苷酸作為引物通過聚合酶鏈反應（PCR）法對屬于半內(nèi)果菌（Hamigera）屬的菌類進行鑒定的工序，

（D-3）序列號16～21中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸；

（D-4）在序列號16～21中任一個記載的堿基序列中使1～3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于半內(nèi)果菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。

4.如權(quán)利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

包括下述4-2）的工序：

4-2）用下述（D-5）或者（D-6）的寡核苷酸作為引物通過環(huán)介導等溫擴增（LAMP）法對屬于半內(nèi)果菌（Hamigera）屬的菌類進行鑒定的工序，

（D-5）序列號51～56中任一個記載的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸；

（D-6）在序列號51～56中任一個記載的堿基序列中使1～3個堿基缺失、置換或者添加而得到并且能夠用于檢測屬于半內(nèi)果菌屬的菌類的堿基序列或者其互補序列所表示的寡核苷酸。

5.如權(quán)利要求1所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

為了進行鑒定，使用所述（D-1）～（D-2）的寡核苷酸中的至少一種來進行基因擴增，并確認有無擴增產(chǎn)物。

6.如權(quán)利要求5所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

采用聚合酶鏈反應（PCR）法進行所述擴增反應。

7.如權(quán)利要求5所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

采用環(huán)介導等溫擴增（LAMP）法進行所述擴增反應。

8.如權(quán)利要求6所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

在所述4）的工序中，使用下述（D-7）的至少一種寡核苷酸對：

（D-7）由序列號16所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸和序列號17所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸構(gòu)成的寡核苷酸對、

由序列號18所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸和序列號19所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸構(gòu)成的寡核苷酸對、或者

由序列號20所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸和序列號21所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸構(gòu)成的寡核苷酸對。

9.如權(quán)利要求7所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

在所述4）的工序中，使用下述（D-8）的寡核苷酸中的至少一種：

（D-8）序列號51～56中任一個所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸。

10.如權(quán)利要求9所述的耐熱菌類的檢測方法，其特征在于，

在所述4）的工序中，使用下述（D-9）的寡核苷酸組合：

（D-9）寡核苷酸組合，其包含：序列號51所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、序列號52所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、序列號53所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸、以及序列號54所記載的堿基序列所表示的寡核苷酸。