[發明專利]一種山羊生長性狀的MSTN基因分子標記選擇方法

在審

• 申請號: 201410140093.8
• 申請日: 2014-04-09
• 公開（公告）號: CN104342492A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 孟春花;曹少先;傅澤紅;豐秀靜;張俊;錢勇
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

1.一種山羊生長性狀的MSTN基因分子標記選擇方法，其特征在于包括以下步驟：

1）提取山羊基因組DNA；

2）利用兩條特異性引物PCR擴增MSTN5’UTR區，得到593bp擴增產物；所述的兩條特異性引物序列為P1：SEQ?ID?NO.1，P2：SEQ?ID?NO.2；

3）利用DraⅠ限制性內切酶對所述的擴增產物進行酶切，電泳分型，僅獲得593bp片段的定義為AA型，獲得593bp、424bp、174bp三個片段的定義為AB型，獲得424bp、174bp兩個片段的定義為BB型；

4）AB型和BB型的生長性狀明顯優于AA型，選擇AB型和BB型個體留種。

2.依據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述生長性狀為初生體重、六月齡體重、六月齡日增重、九月齡體重、九月齡日增重、初生體高、六月齡體高、九月齡體高、初生胸圍、六月齡管圍。

3.依據權利要求1或2中任意一項所述的方法，其特征在于：所述山羊為波爾山羊。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應總體系為20μL，模板DNA15-100ng，5U/μL?Taq聚合酶0.2μL，10mM的dNTP0.4μL，引物P1和P2各0.6μL，25mM的MgCl₂1.2μL，10×緩沖液2μL，加滅菌雙蒸水至20μL；所述PCR擴增的反應程序為：94℃預變性5min；94℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸45s，35個循環；72℃延伸7min。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述酶切的反應體系為15μL，PCR產物6μL，15U/μL?DraⅠ酶0.5μL，10×緩沖液1.5μL，滅菌雙蒸水7μL；37℃酶切4h。