[發(fā)明專利]乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410140004.X
• 申請(qǐng)日: 2014-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN103918896A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮艷忠;劉娣;鄭世民;陳赫書;何鑫淼;王文濤;吳賽輝;于曉龍;秦國慶;徐會(huì)連
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所
• 主分類號(hào): A23K1/16
• 分類號(hào): A23K1/16;A23K1/14;A23K1/00
• 代理公司: 哈爾濱東方專利事務(wù)所 23118
• 代理人: 陳曉光

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及一種乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法。

背景技術(shù)：

飼料中多種霉菌毒素共存，那種霉菌毒素危害最大，取決于谷物收獲及儲(chǔ)存時(shí)的條件，解決飼料霉菌毒素污染是一個(gè)世界性問題，是解決食品安全和人類健康的大問題。我國華南、華東乃至華北地區(qū)收獲季節(jié)雨量較多，農(nóng)作物在田間就會(huì)受到霉菌的污染。特別是黃曲霉毒素廣泛存在于玉米、花生粕等飼料原料中，嚴(yán)重威脅動(dòng)物的生產(chǎn)性能，每年給飼料工業(yè)和畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)估計(jì)，全世界每年谷物產(chǎn)量的25%受到霉菌毒素污染。Pittet(1998)總結(jié)了世界各地27個(gè)食品和飼料樣品中霉菌毒素的調(diào)查結(jié)果，發(fā)現(xiàn)嘔吐毒素和煙曲霉毒素是最為普遍的霉菌毒素，在谷物樣品中嘔吐毒素的檢出率為75%，各樣品的平均濃度為62.1mg/kg，煙曲霉毒素的檢出率為66%，各樣品的平均濃度為37.6mg/kg，玉米赤霉毒素、黃曲霉毒素B1的檢出率都在50%以下。有報(bào)道表明黃曲霉毒素、T-2毒素、DON、ZEA、OTA、煙曲霉毒素在飼料和飼料原料中普遍存在，并且在配合飼料中霉菌毒素的檢出率要高于單一能量飼料。需要指出的是，評(píng)價(jià)霉菌對(duì)飼料的污染程度主要取決于飼料中霉菌帶菌量，而不是霉菌的檢出率，而評(píng)價(jià)霉菌對(duì)畜禽的危害取決于產(chǎn)毒菌株及毒素含量多少。霉菌毒素對(duì)飼料和原料的污染是一個(gè)全球性問題，據(jù)統(tǒng)計(jì)全世界每年約有5%~7%的糧食及飼料發(fā)生了霉變，已造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。眾多研究表明，高濃度的霉菌毒素會(huì)使動(dòng)物急性中毒，即使飼喂含低濃度霉菌毒素的飼料也可使動(dòng)物發(fā)生慢性中毒癥狀。霉菌毒素的危害主要表現(xiàn)在可以破壞和降低原料或飼料中的養(yǎng)分、造成動(dòng)物臟器和組織損傷、造成嚴(yán)重的繁殖障礙和免疫抑制等，這些影響還可以通過肉、蛋和奶等食物鏈對(duì)人類健康產(chǎn)生危害。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的是提供一種乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法。

上述的目的通過以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，該方法包括如下步驟：

（1）一級(jí)菌種的制備；

（2）二級(jí)菌種的制備；

（3）乳酸菌液培養(yǎng)；

（4）發(fā)酵植物。

所述的乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，步驟（1）所述的一級(jí)菌種的制備的方法是將乳酸菌菌種用普通乳酸菌培養(yǎng)基湯稀釋或經(jīng)普通乳酸菌培養(yǎng)基湯繁殖后，接種于乳酸菌培養(yǎng)基平板，37℃培養(yǎng)22--24h，選取菌落為圓形，中等大小，凸起，微白色，濕潤，邊緣整齊中等大小菌落5-10個(gè)，無菌條件下混合分別接種于乳酸菌瓊脂斜面若干支，37℃培養(yǎng)24h，經(jīng)純粹檢驗(yàn)合格，作為一級(jí)菌種，在2-8℃保存，應(yīng)不超過2個(gè)月，此間可移植1-2次，在培養(yǎng)基上繼代，不超過4代。

所述的乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，所述的乳酸菌培養(yǎng)基平板、普通乳酸菌瓊脂斜面組成為：蔗糖3%，瓊脂1.5%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.5%，KH₂PO₄?0.1%，Tween80水溶液0.5%，CaCO₃?2%。

所述的乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，步驟（2）所述的二級(jí)菌種的制備方法是取一級(jí)菌種接種乳酸菌湯瓊脂扁瓶，37℃培養(yǎng)24h后，用乳酸菌培養(yǎng)液沖洗菌苔后接入裝量為9000ml一萬瓶中，37℃培養(yǎng)，檢查合格后，作為二級(jí)種子。在2-8℃保存，應(yīng)不超過3日。

所述的乳酸菌發(fā)酵植物生產(chǎn)抗霉菌毒素飼料添加劑的制備方法，所述乳酸菌湯瓊脂扁瓶組成為：?蛋白胨?10.0g??肉膏?10.0g??酵母粉?5.0g??K₂HPO₄?2.0g??檸檬酸氫二銨?2.0g??無水乙酸鈉5.0g??葡萄糖?20.0g??吐溫-80?1.0ml???MgSO₄?0.28g??MnSO₄·H₂O?0.2g??蒸餾水?1.0L??pH6.8。