[發明專利]一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201410137946.2
• 申請日: 2014-04-08
• 公開（公告）號: CN103933615A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發明（設計）人: 胡建強;葉翠;李愛青;張夢歡
• 申請（專利權）人: 華南理工大學;南方醫科大學
• 主分類號: A61L27/56
• 分類號: A61L27/56;A61L27/54;A61L27/18
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

技術領域

本發明屬于生物功能材料制備技術的領域，特別涉及一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜及其制備方法與應用。

背景技術

慢性腎病是腎損害或腎功能減退持續3個月以上，嚴重地導致尿毒癥。慢性腎病發病率高，致殘致死率高，治療費用昂貴，嚴重影響人們的健康和生活，已成為當前重要的“全球公共健康問題”。蛋白尿是衡量腎小球損傷程度的重要指標,也是導致腎病變的主要因素。因此，減少或消除蛋白從細胞內漏出，是治療腎病或修復腎臟的關鍵。目前，蛋白尿主要使用腎素-血管緊張素系統抑制劑、糖皮質激素等治療，?但病情容易反復，且副作用很大。這些藥物只是暫時控制表征，沒有從根本上修復受損的腎小球濾過膜。

本發明合成的聚合物作為一種生物相容性的材料，在生物醫學領域具有廣泛的應用。然而，將其自組裝成微米級下片狀大小的膜和控制孔的大小在納米級別內，具有很大的挑戰性。本自組裝多孔聚合物膜模擬腎濾過膜濾過膜屏障，具有生物相容性和一定的促進細胞生成作用。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，提供一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜及其制備方法與應用。

一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜，由聚合物自組裝形成的，具有較高的比表面積和多孔。所述自組裝多孔聚合物膜帶有負電性和通透的多孔，所述自組裝多孔聚合物膜的尺寸為80-10000?nm，所述自組裝多孔聚合物膜上孔的尺寸為3-500?nm；所述自組裝多孔聚合物膜上連接有腎小球濾過膜上的nephrin的抗體（anti-nephrin）；所述的膜具有腎小球濾過膜靶向性。所述的自組裝多孔聚合物膜能夠模擬胞外基質，作為一種物理生物的過濾屏障，能減少蛋白尿的產生，促進腎濾過膜的自我修復，進而達到濾過膜的修復。

一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜的制備方法，包括如下步驟：

（1）加入引發劑和有機酯，并用氮氣去除反應瓶中的空氣后密封，在100-200?℃下攪拌反應10-30小時，得到材料a；所述引發劑與有機酯摩爾比為1：300-6000；

（2）將步驟（1）得到材料a用有機溶劑和醇分別溶解和沉淀，如此反復2-6次后；在10-100?℃真空干燥2-20小時，得到中性的聚合物微粒；

（3）將聚合物微粒溶于有機溶劑中，并加入有機酸酐，在20-150?℃下攪拌反應2-20小時，得到負電荷的聚合物微粒；所述聚合物微粒與有機酸酐的摩爾比為1：1-100；

（4）將負電荷的聚合物微粒按照0.001-4%（wt/v%）溶于有機溶劑中，在20-80?℃加入0.005-4倍體積有機溶劑的有機醇，后淬冷，于蒸餾水中交換溶劑，自組裝得到負電荷的自組裝多孔聚合物膜；

（5）將負電荷的自組裝多孔聚合物膜分散到去離子水中，根據經典的EDC與NHS偶聯羧基和氨基法接上腎小球濾過膜上的nephrin的抗體（anti-nephrin），得到用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜；所述的負電荷的自組裝多孔聚合物膜與anti-nephrin的摩爾比為1：1-20

（6）將接上抗體的自組裝多孔聚合物膜分散在生理鹽水中，通過靜脈注射進入到大鼠體內；跟蹤監測大鼠尿蛋白和腎小球濾過膜和腎功能的治療效果。

上述方法中，步驟（1）中所述引發劑包括甲醇、乙醇、乙二醇、丙三醇、丙二醇、異丙醇、丁醇、丁二醇、聚乙二醇、聚酰胺胺醇、聚丙烯胺醇中的一種以上；所述有機酯包括甲酯、乙酯、丁酯、乙酸乙酯、丙交脂、丙酯、乙酸丁酯中的一種以上。

上述方法中，所述有機溶劑包括丙酮、四氫呋喃、吡啶、一氯甲烷、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳和乙酸乙酯中的一種以上；所述醇包括甲醇、乙醇、丙醇、乙二醇、丙三醇、丙二醇、異丙醇、丁醇和已醇中的一種以上。

上述方法中，步驟（4）中所述有機酸酐包括乙酸酐、丙酸酐、丁酸酐、戊酸酐、已酸酐、乙二酸酐、丙二酸酐、丁二酸酐、戊二酸酐和已二酸酐中的一種以上。

上述方法中，步驟（6）的大鼠腎小球濾過膜和腎功能的檢測包括尿蛋白、尿素氮、血肌酐的檢測、組織免疫染色、podocin染色、腎小球濾過膜超微結構的電子顯微鏡觀察。

一種用于腎小球濾過膜修復的自組裝多孔聚合物膜應用于降低蛋白尿和修復腎濾過膜。