[發明專利]PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法

有效

• 申請號: 201410136635.4
• 申請日: 2014-04-04
• 公開（公告）號: CN103933610A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發明（設計）人: 唐志輝;毋育偉;李箐
• 申請（專利權）人: 北京大學口腔醫院
• 主分類號: A61L27/18
• 分類號: A61L27/18;A61L27/54;A61L27/36;A61L27/50;A61L27/12;A61L27/22
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

1.一種PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

步驟1，制備載藥殼聚糖微球：將1500～2000重量份羧甲基殼聚糖溶于酸性溶液中形成第一溶液；將1～2重量份人重組脂聯素和1～2重量份人重組骨形態發生蛋白在酸性溶液中溶解形成第二溶液；將第一溶液和第二溶液溶于含1～3wt%斯盤80的液體石蠟中,于室溫下攪拌均勻形成乳液；將交聯劑緩慢滴入上述乳液中，通過攪拌使交聯充分完成；依次用石油醚、異丙醇和雙蒸水反復洗滌交聯后的產物，凍干后即得載藥殼聚糖微球；

步驟2，選用小牛關節頭或脛骨的骨骺端作為骨原料，經去離子水充分蕩洗后利用改性劑對骨原料行改性，使骨基質的Ca/P原子比降至1.66～1.5；然后在800℃～1100℃溫度條件下煅燒改性后的骨原料以徹底去除骨材料的免疫抗原性，獲得改性煅燒骨粉；

步驟3，將5～8重量份聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶于二氧六環中，加入2～6重量份所述改性煅燒骨粉，充分攪拌后加入1～5重量份載藥殼聚糖微球并充分攪勻，倒入平皿中冷凍過夜，凍干后即得PLGA改型載生物因子微球骨替代材料。

2.根據權利要求1所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于：步驟1，制備載藥殼聚糖微球：將1750重量份羧甲基殼聚糖溶于酸性溶液中形成第一溶液；將1重量份人重組脂聯素和1重量份人重組骨形態發生蛋白在酸性溶液中溶解形成第二溶液；將第一溶液和第二溶液溶于含2wt%斯盤-80的液體石蠟中,于室溫下攪拌均勻形成乳液；將交聯劑緩慢滴入上述乳液中，通過攪拌使交聯充分完成；依次用石油醚、異丙醇和雙蒸水反復洗滌交聯后的產物，凍干后即得載藥殼聚糖微球。

3.根據權利要求1所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于：步驟3，將4重量份聚乳酸-羥基乙酸共聚物溶于二氧六環中，加入6重量份改性煅燒骨粉，充分攪拌后加入5重量份載藥殼聚糖微球并充分攪勻，倒入平皿中于-20℃冷凍過夜，凍干72h后即得PLGA改型載生物因子微球骨替代材料。

4.根據權利要求1-3任一項所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述改性煅燒骨粉的骨基質晶相羥基磷灰石:β-磷酸三鈣=1:3。

5.根據權利要求1-3任一項所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述酸性溶液是體積分數為2%的乙酸溶液。

6.根據權利要求1-3任一項所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述改性劑選自磷酸氫二銨、磷酸二氫銨和磷酸中的一種或幾種。

7.根據權利要求1-3任一項所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述交聯劑為三磷酸鈉水溶液。

8.根據權利要求7所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述三磷酸鈉水溶液的質量分數為5%。

9.根據權利要求1-3任一項所述的PLGA改型載生物因子微球骨替代材料的制備方法，其特征在于，所述人重組骨形態發生蛋白為rhBMP-2。