[發明專利]一種快速檢測高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法

有效

• 申請號: 201410134594.5
• 申請日: 2014-04-04
• 公開（公告）號: CN103913454B
• 公開（公告）日: 2017-01-25
• 發明（設計）人: 李劍波;王徐
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N33/72
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)11491
• 代理人: 姜彥

技術領域

本發明屬于高鐵血紅蛋白血癥檢測技術領域，尤其涉及一種快速檢測高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法。

背景技術

高鐵血紅蛋白（methemoglobin，MetHb）是遺傳因素或吸收毒性化合物后由紅細胞產生的。其含量超過血紅蛋白總量1％時即可引起高鐵血紅蛋白血癥（methemoglobinemia），按原因分為獲得性和遺傳性兩大類。獲得性高鐵血紅蛋白血癥最常見，多為攝入某些氧化（還原）性藥物（如磺胺類、氯喹、伯氨喹等藥物）或毒物（如亞硝酸鹽、硝酸銨、硝酸鉀等化學試劑）時的一過性表現。遺傳性高鐵血紅蛋白血癥（hereditarymethemoglobinemia，HM）絕大部分為NADH-細胞色素b5還原酶（NADH-cytochromeb5reductase，b5R）的遺傳缺陷所致，呈常染色體隱性遺傳，故又稱隱性先天性高鐵血紅蛋白血癥（recessivecongenitalmethemoglobinemia，RCM）；一小部分由血紅蛋白先天異常（即血紅蛋白M）引起，一般呈顯性遺傳。

MetHb含量測定方法有很多種，分為三大類，幾乎所有方法都以比爾-朗伯定律（Beer-Lambert’sLaw）A=E×C×L（A為吸光度，E為吸光系數，C為吸光物質濃度，L為吸光物質溶液的液層厚度或者光程長度）為基礎。但是這些測定方法都普遍存在這設備要求高、檢測速度慢、臨床效果差等問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種快速檢測高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，旨在解決現有檢測方法設備要求高、檢測速度慢、臨床效果差的問題。

本發明是這樣實現的，一種快速檢測高鐵血紅蛋白血含量比色卡的制備方法，包括以下步驟：

（1）用不同濃度的亞硝酸鹽溶液分別作用多份不同組織來源的一級血液樣本，繪制亞硝酸鹽與高鐵血紅蛋白生成率間的效量關系圖；

（2）根據所述效量關系圖，將上述一級血液樣本配置成具有不同高鐵血紅蛋白濃度的二級血液樣本；

（3）將所述二級血液樣本分別滴于空白采血卡上，晾干5～15s后掃描后用繪圖軟件測定高鐵血紅蛋白的R、G、B值，將具有相同高鐵血紅蛋白濃度的R值、G值以及B值分別求和算均值得到R均值、G均值以及B均值；

（4）將所述R均值、G均值以及B均值用繪圖軟件整合并繪制出不同高鐵血紅蛋白濃度的高鐵血紅蛋白比色卡，統計學分析后，打印比色卡。

優選地，在步驟（1）中，所述亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度與高鐵血紅蛋白血濃度的關系用函數定義為：Y=1.2876+24.80X，r=0.995（P<0.001）；其中，X代表亞硝酸鹽溶液的摩爾濃度；Y代表高鐵血紅蛋白血濃度；

在步驟（1）中，所述多份不同組織來源的一級血液樣本具體為：采集50名健康人的靜脈血液樣本，并定義該靜脈血液樣本為一級血液樣本。

優選地，在步驟（2）中，所述二級血液樣本中高鐵血紅蛋白濃度包括：包括正常組、5%～80%百分比濃度，其中，所述5%～80%百分比濃度之間的濃度間隔為5%。

優選地，在步驟（3）中，所述晾干的時間為10s；

在步驟（3）中，所述掃描為通過圖片掃描儀掃描，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件。

優選地，在步驟（4）中，所述繪圖軟件為Photoshop或CorelDRAW繪圖軟件；

在步驟（4）中，所述統計學分析為將具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級血樣R值、G值以及B值分別求和后，在求其算數平均值，得到具有相同高鐵血紅蛋白濃度二級血樣的R算數平均值、G算數平均值以及B算數平均值。

本發明克服現有技術的不足，提供一種快速檢測高鐵血紅蛋白含量比色卡的制備方法。由于與正常的血液相比，高鐵血紅蛋白的血液呈現出一種特殊的棕褐色。而且其濃度越高，顏色越深。此外，RGB色彩模式，即是代表紅（Red）、綠（Green）、藍（Blue）三個通道的顏色使用RGB模型為圖像中每一個像素的RGB分量分配一個0～255范圍內的強度值。RGB圖像只使用三種顏色，就可以使它們按照不同的比例混合，在屏幕上重現16777216種顏色。這個標準幾乎包括了人類視力所能感知的所有顏色，是目前運用最廣的顏色系統之一。