[發明專利]一組用于水禽圓環病毒可視化鑒別診斷的熒光定量引物有效
| 申請號: | 201410134003.4 | 申請日: | 2014-04-04 |
| 公開(公告)號: | CN103882152B | 公開(公告)日: | 2016-10-26 |
| 發明(設計)人: | 萬春和;黃瑜;陳紅梅;程龍飛;傅光華;施少華 | 申請(專利權)人: | 福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 福州元創專利商標代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡學俊 |
| 地址: | 350013 *** | 國省代碼: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一組 用于 水禽 圓環 病毒 可視化 鑒別 診斷 熒光 定量 引物 | ||
1.一組用于水禽圓環病毒可視化鑒別診斷的熒光定量引物,其特征在于:所述PCR引物P1和P2的序列為:上游引物P1:5’-?TAATAGGGAGCCTCGCGATTGGTA?-3’,下游引物P2:5’-?AACCAGGACTTAGTAGTTTATT?-3’。
2.一種如權利要求1所述的一組用于水禽圓環病毒可視化鑒別診斷的熒光定量引物的檢測方法,其特征在于:通過所述引物建立基于SYBR?GreenⅠ實時熒光定量PCR方法,根據利用該引物擴增的水禽圓環病毒鴨圓環病毒和鵝圓環病毒特異基因片段區域核苷酸GC含量的差異導致溶解曲線溫度的差異,根據溶解曲線Tm值的差異可直接對鴨圓環病毒和鵝圓環病毒感染進行檢測。
3.根據權利要求2所述的一組用于水禽圓環病毒可視化鑒別診斷的熒光定量引物的檢測方法,其特征在于:具體包括以下步驟:
(1)提取鴨圓環病毒和鵝圓環病毒基因組DNA;
(2)用所述實時熒光定量引物P1和P2同時對鴨圓環病毒和鵝圓環病毒進行基于SYBR?GreenⅠ實時熒光定量PCR檢測,反應完成后作出溶解曲線;
(3)實時熒光定量PCR反應結束后,根據溶解曲線特異性峰Tm值的差異直接對鴨圓環病毒和鵝圓環病毒感染情況進行可視化定量檢測。
4.一種如權利要求1所述的一組用于水禽圓環病毒可視化鑒別診斷的熒光定量引物在檢測鴨圓環病毒和鵝圓環病毒感染情況方面的應用。
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