[發(fā)明專利]一種纖維素降解菌劑和原料菌株及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410131073.4
• 申請日: 2014-04-02
• 公開（公告）號: CN104059862A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王莉;汪地強;王和玉;江友峰;胡旭;袁頡;王巖
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州茅臺酒股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;C12N1/14;C05F17/00;C12R1/79;C12R1/68;C12R1/72;C12R1/10
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 谷慶紅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物菌劑技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種纖維素降解菌劑和原料菌株及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

堆肥技術(shù)是在高溫、多濕的條件下，通過微生物發(fā)酵腐熟有機固體廢棄物而制成有機肥料的一種技術(shù)手段。木質(zhì)纖維素類有機固體廢棄物的堆肥過程中，纖維素的降解是關(guān)鍵，因為纖維素含量最高而且降解最為緩慢。在好氧堆肥中，如果只依靠堆肥原料中原有土著微生物很難有效的降解堆肥物料中的纖維素，因此需要引入外源特定的微生物，以加快堆肥腐熟過程。對于降解纖維素的菌劑，有的研究者選用單菌株組成的菌劑，如殷中偉等人從黑龍江黑土樣品中篩選出一株能夠降解羧甲基纖維素的絲狀真菌Y5，經(jīng)鑒定為赭綠青霉，將其制備為菌劑，用于降解小麥秸稈。趙方圓等人從牛羊糞堆肥中篩選出一株纖維素降解菌YN1，經(jīng)鑒定為曲霉，將其制備為菌劑，可有效降解秸稈。有的研究者選用由兩種以上菌種組合的復(fù)合菌劑，如李平等人從畜禽養(yǎng)殖場排污口沉積底泥和該養(yǎng)殖場畜禽糞便分離出纖維素降解菌，構(gòu)建了一組由5株細菌組成的復(fù)合微生物，能夠有效降解稻草。楊亞珍等人從枯樹根、爛菜葉、牛糞和牛胃中分離纖維素降解菌，將其兩兩組合，用于降解稻草。對于復(fù)合菌劑，大多側(cè)重菌種間有無拮抗性，將沒有拮抗性菌株組合形成復(fù)合菌劑，較少關(guān)注菌株間的協(xié)同性，尤其碳源利用上的協(xié)同性。

目前，纖維素降解菌劑多用于畜禽糞便及秸稈類的木質(zhì)纖維素堆肥的外源接種劑，如劉佳等人以牛糞和稻草為堆肥原料，研究了接種 纖維素降解菌對牛糞堆肥微生物群落的影響，發(fā)現(xiàn)接種菌堆肥與自然堆肥相比，微生物數(shù)量的變化趨勢快于自然堆肥，接種菌在堆肥初期能夠激發(fā)微生物增殖，快速啟動堆肥發(fā)酵，縮短堆肥進程。四川農(nóng)業(yè)大學的胡華研究了高效纖維素降解菌株復(fù)合系菌劑在秸稈堆肥中的應(yīng)用，結(jié)果表明：接入纖維素降解復(fù)合菌劑的處理T，平均C/N比為19.27，比CK1低17.10，平均纖維素含量為21.25％，比CK1低6.35％，平均種子發(fā)芽率為101.3％，比CK1高33.7％。酒渣又叫酒糟，是指自谷物中蒸出酒精或酒精飲料后的殘渣，即釀酒后產(chǎn)生的渣滓，常用作家畜飼料。利用酒渣堆肥生產(chǎn)有機肥，不僅可以變廢為寶，還有利于促進農(nóng)村經(jīng)濟的發(fā)展，減少環(huán)境的污染。在現(xiàn)有技術(shù)中，對于用于酒渣堆肥中的纖維素降解外源菌劑報道較少。

雖然酒渣中含有大量纖維素，但是如CN1928074A、CN101560488A、CN101974436A和CN1460664A公開的微生物菌劑，應(yīng)用于酒渣堆肥的效果并不理想。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種可加速纖維素降解和腐熟的復(fù)合菌劑以及組成這種復(fù)合菌劑的原料菌株，以及這種降解纖維素的復(fù)合菌劑在降解纖維素和酒渣堆肥中的應(yīng)用及其制備方法。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明的宛氏擬青霉菌株MM2，其分類命名為Paecilomyces varioti，現(xiàn)已經(jīng)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC NO.7903，保藏日期2013年7月8日。

本發(fā)明的煙曲霉菌株MM6，其分類命名為Aspergillus fumigatus，現(xiàn)已經(jīng)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC NO.7904，保藏日期2013年7月8日。

本發(fā)明的皺落假絲酵母菌株MJ4，其分類命名為Candida rugosa，現(xiàn)已經(jīng)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC NO.7902，保藏日期2013年7月8日。

本發(fā)明的地衣芽孢桿菌菌株MX8，其分類命名為Bacillus licheniformis，現(xiàn)已經(jīng)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路中科院微生物研究所，保藏編號CGMCC NO.7901，保藏日期2013年7月8日。

本發(fā)明的宛氏擬青霉(Paecilomyces varioti)菌株MM2的形態(tài)和顯微學特征是：菌株加在麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基上，在25℃黑暗條件下，培養(yǎng)7天，菌落直徑擴展為80mm，黃褐色，絨毛狀，至近粉狀；分生孢子梗自氣生菌絲生出，瓶梗單生或輪生(8-20)×(2.5-3)μm。分生孢子呈橢圓形或短柱形，光滑，鏈狀著生于瓶梗上，長徑為(3-5)×(2-2.5)μm。