[發明專利]魚精蛋白模擬肽及其藥用鹽與應用

有效

• 申請號: 201410129611.6
• 申請日: 2014-04-01
• 公開（公告）號: CN104072587B
• 公開（公告）日: 2017-04-19
• 發明（設計）人: 竇桂芳;韓蘇;孟志云;朱曉霞;甘慧;顧若蘭;吳卓娜;劉桃云;李儉;鄭穎;李通
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院野戰輸血研究所;韓蘇
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K7/06;A61K38/10;A61K38/08;A61P7/04
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司11322
• 代理人: 魯兵

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，特別是涉及人為設計、人工合成的由堿性氨基酸組成的直鏈多肽分子（魚精蛋白模擬肽），該多肽分子具有魚精蛋白的功能，在血液中對肝素具有中和與拮抗作用，可替代魚精蛋白在臨床上用于消除及中和血液中由肝素引起的出血傾向。

背景技術

心血管疾病患者在實施心外循環或支架介入的手術之前需向血管中注射抗凝藥肝素，以避免在手術過程中產生血栓，但在手術完成后需要及時消除血管中的肝素避免發生流血不止的惡性事件。目前，臨床上用于拮抗肝素的唯一藥物是魚精蛋白，但是使用魚精蛋白具有以下缺點或弊端:

1、魚精蛋白是從鮭魚、鱒魚、鯡魚的成熟精子的細胞核中提取的蛋白，它包含的是一類蛋白分子群，其分子量在8000道爾頓以下，主要分子區間在4000-6000道爾頓范圍，因此嚴格地說魚精蛋白不是單一分子的純蛋白制品；

2、由于魚精蛋白成品是非均一態的分子群，因此其拮抗肝素的作用量隨制備魚精蛋白的批次不同而不同，其質量難以達到均一性及一致性；

3、魚精蛋白是從魚的成熟精子中提取，從生產原料的資源角度限制并制約了魚精蛋白的出產。

4、魚精蛋白是外源大分子蛋白，人體會對其產生過敏反應，尤其對再次使用魚精蛋白的病人可能會造成重大醫療事故，存在臨床使用的隱患和風險。

使用魚精蛋白雖存在缺點或弊端，但到目前為止還未有其它可拮抗肝素的魚精蛋白替代藥物出現。

發明內容

本發明的目的是提供一系列人為設計、人工合成的由堿性氨基酸組成的直鏈多肽分子即魚精蛋白模擬肽，該多肽分子具有魚精蛋白的功能，在血液中對肝素具有中和與拮抗作用，可替代魚精蛋白在臨床上用于消除及中和血液中由肝素引起的出血傾向。

本發明提供的魚精蛋白模擬肽，是由9-20個堿性氨基酸組成的直鏈多肽，所述堿性氨基酸為選自精氨酸（Arg，R）、賴氨酸（Lys，K）和組氨酸（His，H）中的一種或多種。

氨基酸為多種時，直鏈多肽中三種堿性氨基酸精氨酸、賴氨酸和組氨酸可以在任意位置、以任意比例組合。

具體的，所述系列魚精蛋白模擬肽由9～20個單純精氨酸組成（R9～R20），或由9～20個單純賴氨酸組成（K9～K20），或由9～20個單純組氨酸組成（H9～H20）。少于7個氨基酸的肽鏈沒有拮抗肝素的效果，由9個氨基酸組成的肽鏈開始顯示拮抗肝素的活性，且隨著氨基酸肽鏈的延長，拮抗肝素的活性增加。另一方面，肽鏈拮抗肝素的效果與組成肽鏈的氨基酸堿性強弱呈正相關的關系，即相同數量的氨基酸肽鏈，單純由精氨酸組成的肽鏈拮抗肝素的效果優于單純由賴氨酸組成的肽鏈，單純由賴氨酸組成的肽鏈拮抗肝素的效果優于單純由組氨酸組成的肽鏈。

在以上由精氨酸組成的魚精蛋白模擬肽中以一個組氨酸替換，組氨酸可處于任意位置。組氨酸在肽鏈所處的位置未對模擬肽拮抗肝素效應有明顯的干擾。

優選的魚精蛋白模擬肽是由9～20（尤其優選為15）個精氨酸組成的肽鏈。

另一優選魚精蛋白模擬肽是由9～20（尤其優選為15）個精氨酸組成的肽鏈，但其中任意一個位置可替換成一個組氨酸（基于15個精氨酸的直鏈長肽，由14個精氨酸和1個組氨酸組成，標記為R15-H）。該模擬肽有利于對該藥物分子做同位素（如碘）標記。

另外，以上所述系列魚精蛋白模擬肽任何成鹽形式的化合物(藥用鹽)也屬于本發明。成鹽形式包括無機鹽形式，如硫酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、碳酸鹽等；有機鹽形式，如馬來酸鹽、枸櫞酸鹽、酒石酸鹽、磺酸鹽、水楊酸鹽、蘋果酸鹽等。系列魚精蛋白模擬肽的無機、有機酸成鹽形式不影響其拮抗肝素的效果。

本發明另一目的在于提供所述系列魚精蛋白模擬肽及其成鹽形式的化合物在制備拮抗肝素藥物中的應用。該藥物在臨床上用于消除與中和血液中由肝素引起的出血傾向。

本發明設計、人工合成的由氨基酸組成的直鏈多肽分子（魚精蛋白模擬肽）相對魚精蛋白具有以下優勢：

1、療效確切：本發明的魚精蛋白模擬肽及其成鹽形式的化合物在血液中對肝素具有中和與拮抗作用；

2、本發明的魚精蛋白模擬肽是人為設計的多肽分子，由堿性氨基酸組成，具有明確的氨基酸組成及分子序列，便于人工合成。

3、本發明的魚精蛋白模擬肽可通過人工合成的方式在短時間內、大批量、高純度地制備完成，不僅擺脫了使用天然魚類資源的問題又滿足了臨床上大批量需求的需要。