[發(fā)明專利]一種消癥丸制劑的指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410126546.1
• 申請日: 2014-03-31
• 公開（公告）號: CN103983704A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設計）人: 狄留慶;趙曉莉;嚴燕青;貢磊;康安;單進軍;李俊松;李全
• 申請（專利權）人: 雷允上藥業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

優(yōu)先權?

對于本申請，申請人要求在中國申請的專利，申請日為2013年7月30日，申請?zhí)枮?01310325229.8的優(yōu)先權。?

技術領域

本發(fā)明涉及一種中藥制劑的質量檢測方法，具體涉及一種消癥丸制劑的指紋圖譜檢測方法。?

背景技術

消癥丸是由河南中醫(yī)學院老中醫(yī)趙俊學老師在明代張介賓《景岳全書》中柴胡疏肝散的基礎上，根據乳腺增生病的發(fā)病機理加減而成，在臨床中應用幾十年，對乳腺增生癥的療效確切。該方由柴胡、香附、大黃、青皮、川芎、當歸、白芍、莪術、土鱉蟲、浙貝母、王不留行十一味藥材組成，具有舒肝行氣、活血化痰、軟堅散結的功效。主治氣滯血瘀痰凝所致的乳腺增生病。癥見乳房腫塊，乳房脹痛或刺痛，可伴胸脅疼痛，善郁易怒，胸悶，脘痞納呆，月經量少色暗，經行腹痛。舌暗紅或有瘀點、瘀斑，苔薄白或白膩。脈弦或澀。?

現有檢測方法(專利ZL201110058699.3)對該產品中柴胡、香附、大黃、青皮、浙貝母、白芍6味藥材進行薄層鑒別以及對大黃藥材中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚進行HPLC含量測定。該方法步驟繁瑣，且消癥丸制劑由十一味藥材組成，僅僅測定其中的一味藥材含量不足以全面對該復方的制劑的質量進行控制。現有方法沒有對其中主要多味藥材中的化學成分進行全面、系統(tǒng)的檢測，因此不能全面監(jiān)控中間體、成品的質量。?

近年來，中藥指紋圖譜技術已日漸成熟，能夠很好的控制藥品的質量，保證藥品的有效性和質量可控性，已經成為一種業(yè)內公認的、可靠的、高效的技術手段，是中藥質量控制的發(fā)展趨勢。?

因此，為了更全面、有效的控制該消癥丸制劑的質量，提高其質量控制水平，讓臨床用藥安全及療效更加有所保證，很有必要在現有技術的基礎之上研究設計出一種能客觀、準確，全面檢測消癥丸制劑質量的指紋圖譜測定方法。?

發(fā)明內容

發(fā)明目的：本發(fā)明的目的是提供一種通過HPLC指紋圖譜對消癥丸制劑進行檢測的方法，本發(fā)明的目的是解決現有技術的不足，提供一種精密度高，重復性和穩(wěn)定性好，能客觀、全面、準確的評價消癥丸制劑質量的指紋圖譜檢測方法，能更有效的保證成品的質量，對控制?消癥丸制劑的質量具有重要作用。該方法采用HPLC梯度洗脫在一個流動相系統(tǒng)首次同時檢出復方中十味藥材成分，從色譜峰的特征和相似度結果判斷消癥丸制劑的樣品合格與否，從整體上全面反映消癥丸所用藥材內在質量，不僅能全面反映消癥丸制劑成品的質量，還可根據成品、半成品的指紋圖譜變化追根溯源尋找工藝操作中的問題。本發(fā)明還提供了消癥丸制劑的標準指紋圖譜。?

技術的方案：為了實現以上目的，本發(fā)明的通過HPLC指紋圖譜對消癥丸制劑進行檢測的方法包括如下步驟：?

（1）供試品溶液的制備：取消癥丸制劑內容物細粉1.0g，精密稱定，置50ml錐形瓶中，精密加入濃度為90%乙醇溶液50ml，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，靜置放冷，過濾，濾液減壓回收乙醇，濃縮，上AB-8大孔吸附樹脂柱，分別用400ml水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇，按每小時3～4倍柱體積的流速洗脫，合并40%、60%、80%、95%乙醇洗脫液，減壓濃縮，加甲醇定容至10ml，吸取溶液，過0.45μm濾膜，取續(xù)濾液，即得；?

（2）對照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷、阿魏酸、橙皮苷、大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃素甲醚、大黃酚適量，加甲醇溶解，分別制成芍藥苷濃度為36μg/ml、阿魏酸濃度為56.3μg/ml、橙皮苷濃度為42μg/ml、大黃酸濃度為24.6μg/ml、大黃素濃度為29.8μg/ml、蘆薈大黃素濃度為51.6μg/ml、大黃素甲醚濃度為38.6μg/ml、大黃酚濃度為26μg/ml的對照品溶液；?

（3）消癥丸制劑HPLC指紋圖譜的測定：分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各50μl，進樣，用高效液相色譜儀測定，以參照峰保留時間和峰面積為1，計算供試品相對保留時間和相對峰面積，即得消癥丸制劑HPLC指紋圖譜；?

色譜條件為：色譜柱：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：A相為乙腈，B相為0.3％磷酸水，梯度洗脫；檢測波長：245nm～254nm；柱溫35℃～45℃；流速0.8ml/min～1ml/min。?

色譜條件的篩選：本發(fā)明分別對色譜柱、洗脫系統(tǒng)、洗脫程序、柱溫、檢測波長進行了篩選。?