[發明專利]一種鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜的建立方法

有效

• 申請號: 201410119877.2
• 申請日: 2014-03-27
• 公開（公告）號: CN103869019A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 李霞;馮發青;張俊英;王蘭蘭;李梅;向麗萍;王奧;馬昌洪;朱麗
• 申請（專利權）人: 遵義市產品質量檢驗檢測院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 谷慶紅

技術領域

本發明屬于分析化學領域，具體涉及一種鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜的建立方法。

背景技術

鳳岡地處黔北高原的富鋅富硒地帶，境內丘陵廣布，土壤主要以微酸性黃壤為主，且富含鋅、硒等微量元素，土壤PH值4.5～6.5，土層深厚，土壤疏松肥沃，有機質和氮、磷、鉀含量豐富。鳳岡鋅硒茶產于貴州省遵義市鳳岡縣，是貴州省鳳岡縣的名優綠茶，也是全國唯一的集鋅、硒、有機三位一體的天然營養保健茶，具有色澤綠潤、湯色綠亮、滋味醇厚、葉底嫩綠鮮活等特點，2006年1月國家質檢總局批準對鳳岡鋅硒茶實施地理標志產品保護。

中藥指紋圖譜是指某種(或某產地)中藥材或中成藥進行適當處理后,采用一定的分析手段得到的、能夠標示該中藥材或中成藥特性的某類或數類成分的色譜或光譜的圖譜,它具有特征性和穩定性。通過指紋圖譜的特征性,能有效鑒別樣品的真偽或產地；通過其主要特征峰的面積或比例的限定,能有效控制樣品的質量,確保藥品質量的相對穩定。對非單一成分藥物的質量控制而言,指紋圖譜能全面、綜合地反應和控制中藥或天然藥物質量。

本發明運用中藥指紋圖譜的研究平臺，建立了貴州鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜，可以實現對貴州鳳岡鋅硒茶的真偽鑒別及產品地理保護，并且同時實現對鳳岡鋅硒茶質量的更好控制。

發明內容

本發明要解決的技術問題：針對鳳岡鋅硒茶沒有一種好的質量控制方法，本發明提供了一種鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜的建立方法及其標準譜圖，實現了貴州鳳岡鋅硒茶的真偽鑒別及產品地理保護，并且同時實現對鳳岡鋅硒茶質量的更好控制。

本發明采用的技術方案：鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：

（1）供試品溶液的制備：取樣品粉碎，過40目篩，準確稱取樣品粉末0.25g，置25mL具塞比色管中，加入70%甲醇20mL超聲萃取30min，過濾，濾液過0.45μm微孔濾膜；

（2）指紋圖譜的制作：HPLC的色譜條件：C18色譜柱，4.6×250mm，5μm；柱溫：30℃；流動相A為乙腈，流動相B為0.3%冰乙酸，梯度洗脫：0min5％乙腈，4min14%乙腈，21min14%乙腈，26min15%乙腈，34min15%乙腈，40min17%乙腈，45min25%乙腈，55min25%乙腈；流速：0.3～0.8mL·min^-1；進樣量10μL；檢測波長365nm，記錄譜圖得到鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜；

（3）標準指紋譜圖的確認：按照上述提供的方法，對多批次鳳岡鋅硒茶建立了HPLC指紋圖譜，通過分析比較確定了15個共有特征峰，其保留時間分別為：16.5min、19.6min、20.3min、21.0min、22.0min、23.4min、24.4min、27.5min、31.9min、32.5min、35.5min、37.3min、38.6min、46.2min、50.0min，這些共有峰構成了鳳岡鋅硒茶的指紋特征，作為鳳岡鋅硒茶的標準指紋圖譜。

乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

本發明達到的技術效果：本發明運用中藥指紋圖譜的研究平臺，建立了貴州鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜，可以實現對貴州鳳岡鋅硒茶的真偽鑒別及產品地理保護，并且同時實現對鳳岡鋅硒茶質量的更好控制，主要技術效果體現在一下幾個方面：

（1）精密度高，穩定性好：本發明方法的精密度和穩定性試驗顯示共有峰的相對保留時間、相對峰面積的RSD均小于3%，精密度和穩定性試驗相關系數R均大于0.9，具有良好的精密度和穩定性，符合指紋圖譜的要求。

（2）本發明建立的貴州鳳岡鋅硒茶的HPLC指紋圖譜可靠有效：抽取29批鳳岡鋅硒茶樣品中的前20批、采集于貴州六盤水的4批茶葉樣品、都勻的5批茶葉樣品、銅仁的9批茶葉樣品及湄潭的14批茶葉樣品，對建立的鳳岡鋅硒茶HPLC指紋圖譜模型進行評價，結果顯示所建鳳岡鋅硒茶指紋圖譜能有效應用與鳳岡鋅硒茶的真偽鑒別及產地確認，所建指紋圖譜模型能更好的應用于鳳岡鋅硒茶的地理產品保護及其更全面的質量控制。

附圖說明

圖1：本發明的鳳岡鋅硒茶的標準指紋圖譜；

圖2：精密度試驗的指紋圖譜的疊加圖；

圖3：穩定性試驗指紋圖譜的疊加圖；

圖4：重復性試驗指紋圖譜的疊加圖；

圖5：29批鳳岡鋅硒茶樣品HPLC指紋圖譜；

圖6：本發明鳳岡鋅硒茶HPLC對照指紋圖譜；