[發明專利]利用促進牡丹生長并拮抗病原菌的細菌使牡丹種子萌發和促進牡丹幼苗生長的方法

有效

• 申請號: 201410116389.6
• 申請日: 2014-03-26
• 公開（公告）號: CN104054426A
• 公開（公告）日: 2014-09-24
• 發明（設計）人: 韓繼剛;王云山;胡永紅
• 申請（專利權）人: 上海辰山植物園
• 主分類號: A01C1/00
• 分類號: A01C1/00;A01G7/00;A01G7/06;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.使牡丹種子生根的方法，包括將休眠的牡丹種子進行浸種處理得到浸種后的牡丹種子，用多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101處理所述浸種后的牡丹種子1-3小時，得到菌劑處理的牡丹種子，將所述菌劑處理的牡丹種子進行生根培養得到牡丹生根種子；所述多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.8527。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：用多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101處理所述浸種后的牡丹種子1-3小時為將所述浸種后的牡丹種子置于所述多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌懸液中浸泡1-3小時。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌懸液中所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的含量為10⁸cfu/ml-10⁹cfu/ml。

4.根據權利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌懸液按照包括如下步驟的方法制備：將促進牡丹生長并拮抗病原菌的菌劑懸浮于無菌水中得到所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌懸液，所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的菌懸液中所述多粘類芽孢桿菌

（Paenibacillus polymyxa）CSM1101的含量為10⁸cfu/ml-10⁹cfu/ml；

所述促進牡丹生長并拮抗病原菌的菌劑的制備方法包括：

(1)將玉米秸稈在180-200℃和1.0-2.0Mpa條件下進行水熱處理，得到經過預處理的玉米秸稈；

(2)將所述經過預處理的玉米秸稈粉碎后，用纖維素酶進行酶解，分別收集酶解液和酶解殘渣；

（3）用所述酶解液、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄、CaCO₃、玉米漿和水配制發酵培養基，每升所述發酵培養基中所述酶解液的含量滿足每升所述發酵培養基的葡萄糖含量為20-50g；

(4)向所述發酵培養基中接入促進牡丹生長并拮抗病原菌的細菌進行發酵，發酵結束后收集發酵液，將所述發酵液和所述酶解殘渣混合，得到促進牡丹生長并拮抗病原菌的菌劑；所述促進牡丹生長并拮抗病原菌的細菌為多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）CSM1101，其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC No.8527。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述水熱處理時間為10-20min。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述(2)為將所述經過預處理的玉米秸稈粉碎后，按以干重計每克秸稈加入10-15FPU的比例加入纖維素酶，在55-80℃、pH為4.8-5.0的條件下在水中酶解24-48h，得到玉米秸稈酶解物，將所述玉米秸稈酶解物進行離心，分別收集上清液和沉淀，所述上清液即為所述酶解液，所述沉淀即為所述酶解殘渣。

7.根據權利要求4或5或6所述的方法，其特征在于：每升所述發酵培養基中，(NH₄)₂SO₄的含量為10g，MgSO₄的含量為0.4g、CaCO₃的含量為6g、玉米漿的含量為2g；和/或，所述發酵液和所述酶解殘渣按照1:1的質量比進行混合。

8.根據權利要求4或5或6或7所述的方法，其特征在于：所述(4)在30℃培養18-30小時進行發酵。