[發明專利]寄生蟲卵永久玻片標本制作方法無效
| 申請號: | 201410115789.5 | 申請日: | 2014-03-26 |
| 公開(公告)號: | CN103868774A | 公開(公告)日: | 2014-06-18 |
| 發明(設計)人: | 常志尚;呂銳;王秋波;張艷麗;張文卿 | 申請(專利權)人: | 青島大學 |
| 主分類號: | G01N1/28 | 分類號: | G01N1/28 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266071 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 寄生 蟲卵 永久 標本 制作方法 | ||
技術領域
本發明屬于醫學寄生蟲學領域,涉及一種寄生蟲卵永久玻片標本制作方法,可用于制作各種寄生蟲卵永久玻片標本,尤其可在人體寄生蟲學教學及科研中使用。
背景技術
寄生蟲卵是寄生蟲病的主要診斷階段,也是寄生蟲學教學科研過程中重要的實驗材料。目前,寄生蟲卵玻片標本分為臨時涂片標本和長期玻片標本,臨時涂片標本只能一次性使用,長期玻片標本也只能保存2~3年。由于這類標本保存使用時間短,需要浪費大量的蟲卵不斷地制作補充,因此在寄生蟲學教學科研中,尤其是一些難采集到的寄生蟲卵,更需要制作成永久玻片標本供教學科研長期使用。
發明內容
本發明的目的是提供一種寄生蟲卵永久玻片標本制作方法,制作的蟲卵標本可長期使用及保存。
本發明提供的寄生蟲卵永久玻片標本制作方法,按下列步驟進行:
a、蟲卵清洗固定:將收集的蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的30%~50%酒精,震蕩混勻,放置6~12小時;
b、離心沉淀:將離心管放入離心機,1500~3000轉/分,離心3~8分鐘,棄上清,留取沉淀物;
c、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機中,12~24小時;
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調整懸浮液中蟲卵濃度為500~1500個/ml,放置1~2小時;
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成蟲卵永久玻片標本。
本發明的有益效果是,創造了寄生蟲卵永久玻片標本制作的新方法。通過該方法可以將有價值的蟲卵制成玻片標本永久保存,避免蟲卵(特別是稀有蟲卵)浪費;尤其在教學科研領域,可使教學玻片標本長期重復使用,節約大量的人力、財力及物力。
具體實施方式:
實施例1
短膜殼絳蟲卵永久玻片標本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的短膜殼絳蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的40%酒精,震蕩混勻,放置8小時;
b、離心沉淀:將離心管放入離心機,2500轉/分,離心5分鐘,棄上清,留取沉淀物;
c、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機中,15小時;
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調整懸浮液中蟲卵濃度為800個/ml,放置1小時;
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成短膜殼絳蟲卵永久玻片標本。
實施例2
衛氏并殖吸蟲卵永久玻片標本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的衛氏并殖吸蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的50%酒精,震蕩混勻,放置10小時;
b、離心沉淀:將離心管放入離心機,2000轉/分,離心6分鐘,棄上清,留取沉淀物;
c、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機中,18小時;
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調整懸浮液中蟲卵濃度為600個/ml,放置2小時;
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成衛氏并殖吸蟲卵永久玻片標本。
實施例3
未受精蛔蟲卵永久玻片標本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的未受精蛔蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的50%酒精,震蕩混勻,放置12小時;
b、離心沉淀:將離心管放入離心機,1800轉/分,離心5分鐘,棄上清,留取沉淀物;
c、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機中,20小時;
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調整懸浮液中蟲卵濃度為1000個/ml,放置1.5小時;
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成未受精蛔蟲卵永久玻片標本。
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