[發明專利]一種茶渣添加營養液循環制備金花工藝

有效

• 申請號: 201410114978.0
• 申請日: 2014-03-26
• 公開（公告）號: CN103865811A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 趙運林;胡治遠;劉石泉;龍立平;彭雨軒
• 申請（專利權）人: 湖南城市學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 魏國先

技術領域

?????本發明涉及菌種培養技術領域，具體涉及一種利用茶渣循環制備金花工藝。

背景技術

????金花菌學名為冠突散囊菌（Eurotium?cristarum），主要存在于黑茶中的茯磚茶內，是我國制茶行業唯一二級機密保護菌種，其在茶葉上生長產生的閉囊殼堆積成肉眼可見的金黃色顆粒狀，俗稱金花，金花的多少歷來是評價茯磚茶品質好壞的重要指標。近年來大量研究資料表明“金花”對高血壓、高血脂、糖尿病等疾病具備良好的保健效果，并有提高機體免疫力的作用。

隨著金花保健功效的發掘，對其產品的開發成為了時下研究的熱點，這就需要大量的金花作為提取材料。金花菌生長條件較為苛刻，往往只在發酵良好的茯磚茶內部有少量存在，因此從茯磚茶中大量收集金花的方案是不現實的，而利用散茶或其他植物原料培養金花成本亦較高。本發明是為了實現金花產品的開發利用而研制的一種茶渣添加營養液循環制備金花工藝。

中國專利（申請號：201210470477.7）提供了“一種茯磚茶金花菌孢子粉的制備方法”，該專利不足之處在于：

（1）使用250mL/500mL錐形瓶作為培養容器、麩皮平鋪厚度為1.0～1.3cm，一次培養獲得的曲種較少；

（2）首先需發酵培養獲得曲種，再以發酵完成的曲種擴大培養，所有操作均需在無菌條件下進行，發酵容器外需包裹8層紗布，且0~36h時還需加蓋透氣封口膜，其操作較為繁瑣，不適宜大批量生產；

（3）所用培養基質不可重復利用，原料的消耗量較大。

發明內容

?本發明所要解決的技術問題是：解決現有金花生產工藝原材料消耗大，成本高的問題，而提供一種茶渣添加營養液循環制備金花工藝，實現了對發酵原料的重復利用，并且生產周期較短，能為金花研究與產品開發提供大量的原料。

本發明采用的技術方案是：一種茶渣添加營養液循環制備金花工藝，其步驟如下：

（1）從茯磚茶中篩選金花菌菌種；

（2）制備改良PDA發酵液，無菌操作接種金花菌，28℃培養6d；

（3）將發酵液瓶180rpm振蕩20min，使金花菌孢子與菌絲分離，之后用雙層無菌紗布過濾除去菌絲，得到金花菌孢子接種液；

（4）制備金花菌生長營養液；

（5）將干茶渣粉碎（或是之前制備金花工藝中回收的茶渣），加入30％左右營養液充分混勻，即為培養基質，將基質平鋪在不銹鋼方盤發酵容器內，調節厚度為2.5cm左右，蓋上玻璃蓋，100℃烘1h，冷卻24h后重復烘1h；

（6）將金花菌孢子接種液置消毒噴壺內，均勻噴灑到冷卻的培養基質表面，1kg基質用接種液15~20mL，蓋上玻璃蓋，67℃預烘1h；

????（7）將容器取出置于28℃環境下持續發酵3d，待白色菌絲遍布基質表面并開始轉黃時，即完成營養生長，此時提高室溫為30~32℃并加強室內空氣流通，以促進閉囊殼產生；

????（8）發酵6d時取下玻璃蓋，拌勻發酵底物，控溫為38~42℃干燥；

（9）待基質充分干燥后，100目電動篩重復篩分兩次，獲得純度較高的金花，并收集茶渣以備下次重復利用。

所述的步驟（1）中金花菌菌種從湖南益陽茶廠有限公司08年產金湘益牌茯磚茶中分離純化獲得，經廣東微生物研究所鑒定為冠突散囊菌；

所述的步驟（2）中改良PDA發酵液，其特征在于，每升培養基使用200g馬鈴薯、50g蔗糖，方法為將去皮切碎的馬鈴薯置適量水中煮爛，雙層紗布濾去馬鈴薯渣，濾液加入蔗糖并攪拌溶解，定容至1000mL，分裝三角瓶滅菌；?

所述的步驟（2）和步驟（3）金花菌孢子接種液，其具體制備方法為，待改良PDA發酵液滅菌冷卻后，無菌操作接入金花菌，28℃靜置培養6d至產生大量的金花菌菌體，將三角瓶置搖瓶機上180rpm振蕩20min使孢子與菌絲分離，雙層紗布過濾去除菌絲，即獲得金花菌孢子接種液；

所述的步驟（3）金花菌孢子接種液，通過涂布平板法測定孢子含量＞108個/mL；

所述的步驟（4）金花菌生長營養液能提供金花菌生長所需的氮源、碳源等生長素，其中含馬鈴薯30％、蔗糖20％、NaCl?5％，具體制備方法為：將去皮切碎的馬鈴薯300g置適量水中煮爛，雙層紗布濾去馬鈴薯渣，濾液加入200g蔗糖、50gNaCl并攪拌溶解，定容至1000mL；