[發明專利]一種從番石榴葉中分離出的新化合物、制備方法及用途

在審

• 申請號: 201410114230.0
• 申請日: 2014-03-26
• 公開（公告）號: CN103880911A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 歐陽文
• 申請（專利權）人: 湖南中醫藥大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00;A61K31/56;A61P3/10;A23L1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫藥、功能食品領域，特別是從番石榴葉中制備的新化合物具有降糖功能，從而用于2型糖尿病人的防治。?

背景技術

2型糖尿病是多種致病因子作用于機體導致胰島功能減退、胰島素抵抗等而引發的一系列代謝紊亂綜合征。世界衛生組織指出，世界范圍內的糖尿病形勢仍然非常嚴峻，而發展中國家的形勢尤其令人擔憂。?

番石榴葉作為民間用藥用來預防和治療糖尿病已有悠久的歷史，有大量的關于番石榴葉在二型糖尿病病人疾病的防治過程的文獻報道，且大量的臨床試驗證明其療效確切，因此國內外許多學者對其降糖效果展開了大量的研究，但到目前為止，番石榴葉中降血糖活性成分和作用機制尚未得到確切證實。番石榴葉資源在我國非常豐富，如果對番石榴葉進行深入系統的研究，確定其降糖作用物質基礎、鑒定其降糖單體的化學結構、明析其作用機理，并在此基礎上開發出防治2型糖尿病發生發展的降糖藥物或功能食品，不僅可以充分利用番石榴葉資源，而且還可以減少糖尿病人的痛苦、創造出較大的經濟效益和社會效益。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種從番石榴葉中分離出的新化合物。化合物的化學名稱為：3α,?22α二羥基齊敦果烷-12-烯-30酸（3α,?22α-dihydroxyolean-12-en-30-oic?acid），經活性實驗證明該化合物具有很好的促葡萄糖攝取作用。?

本發明提供的新化合物是由番石榴葉經過反復硅膠柱層析、薄層層析和結晶分離所得，其化學結構式由波譜解析法確定如下：?

該化合物的制備方法包括以下步驟;

（1）稱取粉碎的番石榴葉粉末，加入體積10倍的石油醚，回流提取兩次后過濾，濾渣揮干溶劑后加入體積10倍的氯仿在60°C回流提取3次，過濾，氯仿溶液減壓回收溶劑得氯仿提取物，備用。

（2）氯仿提取物進行硅膠柱層析分離，采用石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，石油醚和乙酸乙酯的體積比例依次為50:1，20:1，10:1，5:1，1:1，0:1。經TLC檢測，顯色，合并相同組分，經甲醇重結晶得該化合物。?

????該新化合物作為制備降糖藥物或降糖保健食品或功能食品添加物的用途。?

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四、具體實施方式??

本發明所述的新化合物是從番石榴葉經過反復硅膠柱層析、薄層層析和結晶等方法分離出來。以下結合實際情況，對本發明的具體實施方式進行詳細說明：

1.????????提取：稱取粉碎的番石榴葉粉末3.2kg，加入體積10倍的石油醚，回流提取兩次后過濾，濾渣揮干溶劑后加入體積10倍的氯仿在60°C回流提取3次，過濾，氯仿溶液減壓回收溶劑得氯仿提取物21.8g，備用。

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2.????????柱層析分離及溶劑重結晶:?氯仿提取物進行硅膠柱層析分離，采用石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，石油醚和乙酸乙酯的體積比例依次為50:1，20:1，10:1，5:1，1:1，0:1，TLC檢測，顯色，合并相同組分，共分得10粗組分。第四組分1.2g再次經硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯10:1，5:1梯度洗脫，從石油醚-乙酸乙酯10:1組分經甲醇重結晶得該化合物12.7mg。

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3.????????化合物結構鑒定：

化合物為無色結晶性粉末，薄層層析展開后，硫酸烘烤顯紫紅色，另外醋酐-濃硫酸反應陽性，最終顯示紫紅色，說明該化合物為三萜類化合物。

電子轟擊質譜給出分子離子峰472，及大氣壓化學電離質譜給出準分子離子峰471.2?([M-H]^-)說明化合物的分子量為472?amu。結合化合物的碳譜和DEPT譜共顯示其含有7個甲基(δ?15.1,?16.4,?22.2,?24.7,?25.8,?28.2?and?28.6)、9個亞甲基、6個次甲基(其中，2個連氧?δ?73.7?and?74.5,?1個為烯碳，其余三個為sp³雜化)和8個季碳。氫譜碳譜清楚的揭示化合物為一齊敦果烷型三萜類化合物，分子式為C₃₀H₄₈O_4?（不飽和度Ω=7），分子中含有兩個羥基、一個羧基和一個雙鍵（在12、13位置）。?