[發明專利]一種RNA的制備方法在審
| 申請號： | 201410113861.0 | 申請日： | 2014-03-25 |
| 公開（公告）號： | CN103865922A | 公開（公告）日： | 2014-06-18 |
| 發明（設計）人： | 梁興國;王星宇 | 申請（專利權）人： | 中國海洋大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 266100 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 rna 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種RNA的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）設計與目的RNA互補的cDNA，將所述cDNA在短鏈DNA和DNA連接酶的作用下連接成環，形成環狀cDNA；
（2）利用RNA聚合酶，以滾環擴增的形式合成出長鏈RNA，該長鏈RNA含有所需RNA序列的串聯重復序列；
（3）利用特異性的核酸序列和其它酶或者化合物，將串聯產物在特異性位點切割，生成所需序列。
2.如權利要求1所述的RNA的制備方法，其特征在于，在步驟（1）中，所述短鏈DNA序列和cDNA鏈的首尾序列進行堿基互補配對，并使cDNA首尾相接，形成環狀cDNA。
3.如權利要求2所述的RNA的制備方法，其特征在于，所述短鏈DNA長度為11～15nt。
4.如權利要求3所述的RNA的制備方法，其特征在于，在步驟（2）中，所述RNA聚合酶為T7RNA聚合酶、E.coliRNA聚合酶或Syn5RNA聚合酶。
5.如權利要求4所述的RNA的制備方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述特異性的核酸序列為氧甲基化修飾的短鏈DNA序列，所述DNA序列同RNA產物在預期位置互補配對結合，并在RNaseH的作用下，在特定位點切割RNA，得到目的RNA序列。
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