[發明專利]一種鯖魚罐頭加工副產物酶解制備抗氧化肽的方法

有效

• 申請號: 201410112866.1
• 申請日: 2014-03-25
• 公開（公告）號: CN103849671A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 付才力;葉秀云;林娟;謝金盛;鄭明星;楊雪娜
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

?本發明屬于功能性食品加工技術或生物制藥技術領域，具體涉及一種鯖魚罐頭加工副產物酶解制備抗氧化肽的方法。

背景技術

????（1）我國水產加工蒸煮液及副產物產量巨大亟待開發

????《2011漁業統計年鑒》顯示，我國大陸地區2010年出口魚罐頭9.8萬噸，在水產罐頭尤其是魚罐頭生產中，會產生大量蒸煮液和下腳料，每年我國魚類加工中總計有近百萬噸蒸煮液亟待開發，而低值處理作飼料或拋棄的下腳料則達幾百萬噸。目前企業因為缺乏有效的技術手段，多數采用直接排放，對我國水體環境持續造成污染和破壞；而這些蒸煮液里富含優質魚油和蛋白，未能得到高效利用，也增加了魚罐頭等產品的生產成本，成了制約魚類加工企業發展的重要因素之一。

????魚類加工蒸煮液及下腳料中蛋白的回收和加工能給企業帶來很高的直接經濟收益。研究表明，金槍魚蒸煮液中蛋白含量達4%，每年臺灣省光金槍魚罐頭加工所產生的蒸煮液中就至少含有400噸優質蛋白。魚類加工下腳料中含有的蛋白含量更是可高達20%以上。魚類加工蒸煮液及下腳料中的蛋白是生物活性肽的優質來源，水產蛋白源生物活性肽具有多種生理功能。因此回收蒸煮液和下腳料中蛋白，酶解蛋白制備生物活性肽，有助于魚類加工企業實現蒸煮液和下腳料的環保化、高值化開發，延長魚類加工企業產業鏈，提升企業的競爭力，促進產業升級，為低碳經濟發展作貢獻。

（2）國內外技術發展現狀與趨勢

目前海洋生物活性肽的提取方法主要有3種：溶劑萃取、微生物發酵和酶水解。由于酶水解法沒有有機溶劑及有毒的化學品的殘留已成為食品和制藥工業的首選方法。在酶法制備的過程中若要獲得理想的提取率，蛋白酶的選擇、酶解條件的選擇、分離技術這三方面至關重要。

①水解酶的選擇

目前在工業生產上應用比較廣泛的蛋白酶主要有胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、組織蛋白酶、胃蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶等內肽酶。由于不同的蛋白酶酶切位點不同，同一蛋白片段在使用不同蛋白酶酶解后，所得的產物生物性質將差異很大，因此開發特定功能的生物活性肽時要根據要求選擇合適的一種或幾種蛋白酶。

②酶解條件的研究

酶解的時間、最適pH、最適溫度以及加酶量、料液比是影響最終多肽得率的重要因素。首先，酶解時間對多肽得率至關重要，在酶解過程中多肽得率呈現了4個階段：迅速上升階段，緩慢增長階段，穩定階段，輕微下降階段。其中穩定階段多肽含量最高。因此，在酶解過程中，必須掌握好酶解時間。其次，蛋白酶的最適作用溫度、pH對多肽得率影響顯著。在不同的反應體系中，要根據底物濃度、種類及緩沖液等因素來設定蛋白酶的最適作用溫度、pH等反應條件。

③酶解產物的分離純化研究

酶法水解后蛋白質分解成長度不一的肽鏈，但生物活性肽的分子量大小在很大程度上決定其生物特性，所以要獲得特定功能特性的生物活性肽，分子量是較重要的因素之一。酶法水解后如何提純是酶法制備工藝的重中之重，目前常用的分離純化方法有超濾法、離子交換層析法、凝膠過濾柱層析、毛細管電泳、吸附分離、反滲透，以及一些方法的聯用技術。超濾法分離技術是通過采用適當規格的超濾膜來分離純化出理想分子量大小的肽類，超濾法不但可以純化多肽而且對多肽起到一定的濃縮作用，這種方法操作簡單，因此成為目前眾多研究者的首選方法。但超濾法一般得到特定分子量的多肽片段，要想獲得單一成分，還需要通過交換層析技術與其它色譜技術相結合，然后通過電泳、氨基酸分析儀、質譜等來檢測其純度。

???目前實驗室制備生物活性肽的方法還不適合工業化生產，在選擇合適的蛋白酶條件下，應通過控制酶解過程各個環節來實現。目前已報道兩種制備海洋生物活性肽的較有效方法：一是可以使用一個三酶系統使酶進行連續水解；二是將多步循環膜反應器和超濾膜系統聯合使用，使酶連續水解。多步循環膜反應器技術裝備和超濾膜系統的聯用是近年來一種新興的分離生物活性物質的方法，具有廣闊的應用前景。

④利用酶解魚罐頭副產物制備生物活性肽的國內外技術發展現狀與趨勢