[發明專利]一種檢測結核分枝桿菌復合群的引物對及其應用

有效

• 申請號: 201410111291.1
• 申請日: 2014-03-24
• 公開（公告）號: CN103882130A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 朱寶利;張衛紅;孫照剛;苗慧芳;劉飛;張瑞芬
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所;北京曠博生物技術有限公司;首都醫科大學附屬北京胸科醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/32
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.用于檢測或輔助檢測結核分枝桿菌復合群的引物對，其特征在于：所述引物對為由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對。

2.根據權利要求1所述的引物對，其特征在于：組成所述引物對的兩條單鏈DNA分子的摩爾比為1：1。

3.用于檢測或輔助檢測結核分枝桿菌復合群的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒含有權利要求1或2所述的引物對、dNTP和DNA聚合酶。

4.制備權利要求1或2所述引物對的方法，包括將組成所述引物對的兩條單鏈DNA分子分別單獨包裝的步驟。

5.制備權利要求3所述試劑盒的方法，包括如下步驟：將組成所述引物對的兩條單鏈DNA分子分別單獨包裝后，與如下物質包裝于同一個試劑盒內：dNTP和DNA聚合酶。

6.權利要求1或2所述引物對，或權利要求3所述的試劑盒在檢測或輔助檢測結核分枝桿菌復合群的非疾病診斷目的的應用，或在制備檢測或輔助檢測結核分枝桿菌復合群的產品中的應用。

7.利用權利要求1或2所述引物對，或權利要求3所述的試劑盒檢測待測樣本中是否含有結核分枝桿菌復合群的非疾病診斷目的的方法，包括如下步驟：

（1）從待測樣本中提取DNA作為模板，采用權利要求1或2所述的引物對進行PCR擴增，得到PCR產物；

（2）根據步驟（1）所得PCR產物的大小，按照如下方法確定待測樣本中是否含有結核分枝桿菌復合群：若PCR產物中含有大小為344bp的DNA片段，則所述待測樣本中含有或候選含有結核分枝桿菌復合群；若PCR產物中不含有大小為344bp的DNA片段，則所述待測樣本中不含有或候選不含有結核分枝桿菌復合群。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：在步驟（1）中，進行所述PCR擴增時采用的退火溫度為56℃。

9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述大小為344bp的DNA片段的核苷酸序列為序列表中序列3所示。

10.根據權利要求1-9中任一所述的引物對或試劑盒或方法或應用，其特征在于：所述結核分枝桿菌復合群為如下中的至少一種：結核分枝桿菌、牛分枝桿菌、非洲分枝桿菌和田鼠分枝桿菌。