[發明專利]一種鐵金合金納米顆粒檢測雙酚A的方法

有效

• 申請號: 201410111194.2
• 申請日: 2014-03-24
• 公開（公告）號: CN103852431A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 梁曉聲;熊海容;王海英;郭小華
• 申請（專利權）人: 中南民族大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/552;G01N21/78
• 代理公司: 武漢華旭知識產權事務所 42214
• 代理人: 周宗貴;江釗芳

技術領域

本發明涉及一種鐵金合金納米顆粒檢測雙酚A的方法，屬于食品和日常用品安全檢測技術領域。

技術背景

雙酚A（Bisphenol?A，縮寫為BPA），一種有機化合物，具有兩個酚官能團。在工業上雙酚A被用來合成聚碳酸酯（PC）和環氧樹脂等材料，60年代以來就被用于制造塑料（奶）瓶、幼兒用的吸口杯、食品和飲料（奶粉）罐內側涂層。后來，人們發現BPA能導致內分泌失調，威脅著胎兒和兒童的健康。癌癥和新陳代謝紊亂導致的肥胖也被認為與此有關。2012年9月24日，美國華盛頓州立大學等機構刊登其研究，公布其在獼猴進行的實驗結果，證實雙酚A會影響獼猴雌性后代的生殖系統，導致卵子染色體異常（Hunt,Patricia?A.et.al.PNAS.2012,109(43)17525-17530）。雖然目前各國已先后禁止了雙酚A在嬰兒奶瓶中的應用，但是在日常成人飲水杯，熱敏紙，食品包裝材料等領域仍有著廣泛的應用。由于雙酚A的大量使用，環境中雙酚A也普遍存在，如自然水體，雨水等都能檢出不同濃度的雙酚A。

目前國內僅出臺了聚合物材料中雙酚A檢出的國家標準，國標采用高效液相色譜來實現雙酚A的檢出，檢出靈敏可靠，然而檢出前處理步驟麻煩，依賴大型儀器，檢測通量不高。對于雙酚A這樣普遍存在的環境污染物而言，快速高通量篩查技術可與高效液相色譜技術形成互補，實現大規模檢測和樣品篩查。快速檢測技術是檢測領域的一塊很有競爭力的方向，快速檢測技術具有檢測方法簡單易行，檢測時間短，不需要大型儀器，甚至無需依賴儀器。盡管快速檢測由于靈敏度和特異性方面的限制，不能作為判定樣品安全性的最終依據；但作為發現問題的第一步，它具有不可替代的作用。事實上，一些突發食源性事件的現場調查也往往以快速檢測作為篩查的第一步。目前雙酚A快速檢測技術還處于初步發展階段，比較常用的有抗體標記納米金試紙條法，利用納米金標記抗體識別雙酚A，抗體雙酚A復合物被捕獲后形成紅色條帶實現檢測。該方法只能提供有或無的結果，而且檢測使用抗體成本較高，無法真正用于大規模篩查。因此，開發一種具有定量能力、成本低廉、快速且檢測通量高的雙酚A檢測方法十分必要。

發明內容

本發明提供了一種鐵金合金納米顆粒檢測雙酚A的方法，該方法能對雙酚A進行定量和半定量分析，成本低廉，且具有檢測通量高、準確和速度快的優點。

實現本發明目的所采取的技術方案為：

一種鐵金合金納米顆粒檢測雙酚A的方法，將檸檬酸鈉溶液加入含有金源、鐵源的溶液中，在加熱的條件下進行反應，制得鐵金合金納米顆粒溶膠，以已知濃度的雙酚A溶液為標準品，鐵金合金納米顆粒溶膠為檢測物，在H₂O₂、過碳酸鈉、過硼酸鈉或三過氧化三丙酮中的一種，與辣根過氧化物酶共同存在的條件下，鐵金合金納米顆粒發生聚集，檢測含不同已知濃度的雙酚A溶液的鐵金合金納米顆粒溶膠在720nm和520nm處的光密度，以720nm和520nm處光密度的比值為縱坐標，以2為底雙酚A濃度的對數為橫坐標，根據檢測的數據繪圖，擬合后得到雙酚A的標準曲線，根據標準曲線得到標準曲線的函數關系式y=kx+b，以實際雙酚A樣品為被檢測物，鐵金合金納米顆粒溶膠為檢測物，在H₂O₂、過碳酸鈉、過硼酸鈉或三過氧化三丙酮中的一種，與辣根過氧化物酶共同存在的條件下，鐵金合金納米顆粒發生聚集，檢測含實際雙酚A樣品的鐵金合金納米顆粒溶膠在720nm和520nm處的光密度，將720nm和520nm處光密度的比值代入函數關系式的y值中，計算出x值，再根據x值計算出實際雙酚A樣品的濃度。

所述的鐵金合金納米顆粒檢測雙酚A的方法，包括如下步驟：

1)鐵金合金納米顆粒溶膠的制備：

①按摩爾比鐵源﹕鐵源和金源=0.001﹕1～0.6﹕1，在帶有攪拌器和回流管的反應容器中加入含有金源和鐵源的溶液，溶液中金源的濃度為0.4～2mM，鐵源的濃度為1μM～0.6mM，持續加熱反應容器中的溶液，同時攪拌溶液，溶液沸騰后，當回流管中的回流量穩定時，按摩爾比檸檬酸鈉﹕鐵源和金源=2:1～5:1，將檸檬酸鈉溶液倒入反應容器中至檸檬酸鈉溶液的終濃度為2～5mM；

②繼續回流至反應容器中的溶液呈穩定的紅色時，停止加熱，讓反應容器中的溶液冷卻至室溫，過濾，得到鐵金合金納米顆粒溶膠；

2）建立雙酚A的標準工作曲線：