[發明專利]一種北蟲草液體菌種的制備方法

有效

• 申請號: 201410110255.3
• 申請日: 2014-03-24
• 公開（公告）號: CN103858676A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 周元科;陳永民;劉群濤;支月娥;劉霞;劉濤
• 申請（專利權）人: 山東晨陽菌業有限公司
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 東營雙橋專利代理有限責任公司 37107
• 代理人: 侯玉山

技術領域

本發明屬于食用菌的使用生產技術領域，具體涉及一種北蟲草液體菌種的制備方法。

背景技術

國內外學者一直在努力探索開發培育新的蟲草菌種，進行擴大化生產和綜合開發，以替代天然的冬蟲夏草，其中以蛹蟲草的研究最多。蛹蟲草又稱為北蟲草，作為傳統珍貴中藥材，北蟲草具有免疫調節作用、能夠治療系統失調、具有抗氧化抗凋亡活性、同時有治療哮喘，支氣管和炎癥的功能。隨著人們生活水平的提高，蟲草作為我國傳統的名貴滋補中藥材，由于的營養、藥用價值很高，市場需求日益擴大。在野生蟲草日益稀少的今天，北蟲草的子實體被中醫認為是最好的入藥部位，且人工培養子實體已實現規模化，因此北蟲草的開發和利用具有廣闊的前景。

北蟲草的菌種一般采用液體菌種，因為其具有滅菌時間短、培養周期短而且活性強的優點而備受重視。栽培實踐證明北蟲草栽培采用液體種方式更易獲得成功和高產，明顯優于固體種栽培的效果。現有的液體菌種培養制備需要搖床、發酵罐等設備，在搖床上培養的液體種菌絲體濃度高，易形成菌絲團或者球，這樣不便于肉眼檢查亮度。

液體種制備是北蟲草栽培步驟中最關鍵技術之一，由于受技術和設備條件限制使北蟲草栽培還只是局限在小范圍，這不利于北蟲草產業的全面推廣普及。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種北蟲草液體菌種的制備方法，該方法克服現有液體菌種培養過程中使用發酵罐、搖床等設備，投資大，操作不便等不足。

本發明的制備方法不使用發酵罐、搖床等設備，不用通氣或者攪拌培養，可以成功培養出健壯活力的菌絲，此方法簡單方便、易于推廣。

本發明的技術方案包括以下步驟：

（1）、配制培養基：將洗凈新鮮的馬鈴薯去皮，稱取200g切成小塊、小條或薄片，向其中加水1000?mL，煮沸20-30?min，用事先浸濕擰干的4層紗布過濾去渣，收集液汁，并向其中加入葡萄糖20?g、磷酸二氫鉀l?g以及硫酸鎂0.5?g攪拌均勻，并補足水分定容至1000ml，最后用氫氧化鈉水溶液調整pH至7.0-7.2得到培養基；

（2）、裝瓶滅菌：按照每瓶裝入的液體量為培養瓶體積的60%，將配好的培養基裝入培養瓶，封口膜封口后，放入高壓滅菌鍋中滅菌；所述的培養瓶為三角瓶、廣口的塑料瓶或玻璃瓶；

（3）、接種：滅菌完成后，等培養液溫度冷卻到28℃以下后，接入北蟲草斜面母種；

（4）、培養：將接種好的培養瓶放到培養箱中避光密閉培養，培養6-8天后即可得到北蟲草的液體菌種；所述培養箱溫度控制在20-25℃，濕度保持在60-70%。

上述方案可進一步優選為：

所述步驟（2）中封口膜采用邊長為12cm、厚度為5mm耐高溫無毒薄膜。

所述步驟（2）中的高壓滅菌程序為121℃下保持30min。

所述步驟（3）的接種是指在無菌條件下挑0.5?cm×0.5?cm小方塊4塊北蟲草斜面母種接入培養基中。

所述步驟（4）中的避光密閉培養需要將接種的菌種瓶先靜置培養48h，以后每天人工搖晃2-3次，每次2分鐘，防止菌絲結塊，同時檢查菌絲生長情況，發現污染的菌種及時剔除。

與現有的技術相比，本發明具有以下優點：

1、本發明提供的方法不使用發酵罐、搖床等設備，不需要通氣或者攪拌培養，可以減少投資，降低生產成本，非常適合大批量的成產和推廣。

2、本發明提供的方法制備的北蟲草液體菌種，及時使用能保證菌絲的良好活性，樣品中菌絲濃度適中，培養液清澈透亮，便于觀察菌絲生長狀況，能及時發現和處理污染的菌種，減少因為菌種污染接種造成的不必要損失。

3、本發明提供的方法不用電，不消耗能源，對環境沒有任何污染，符合國家節能環保的產業政策。

具體實施方式

實施例1

1、準備洗干凈的塑料培養瓶500?mL16只，邊長為12cm，厚度為5mm的正方形的聚丙烯酰胺封口膜和適量橡皮筋。

2、配制方法：洗凈新鮮的馬鈴薯，去皮后稱取400?g，切成小塊(或小條、薄片均可)，加水2000?mL，煮沸20-30?min，至馬鈴薯軟而不爛時，用事先浸濕擰干的4層紗布過濾去渣，取其液汁于燒杯中，再加入葡萄糖40?g，磷酸二氫鉀2.0?g，硫酸鎂1.0?g，并攪拌均勻，補足水至2000?mL；最后用氫氧化鈉水溶液調整pH7.0-7.2。