[發明專利]大豆過氧化物酶免疫生物芯片及在唐氏綜合癥產前篩查血清學標志物檢測中的應用

無效

• 申請號: 201410108570.2
• 申請日: 2014-03-21
• 公開（公告）號: CN103901217A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 薛艷春;蘇娟;車彥軍;王建江;毛世琴;朱偉;田亦平;蔣鐫;翟麗芬;陶嵐;劉松琴;沈麗;吳慧萍
• 申請（專利權）人: 靖江市人民醫院;東南大學
• 主分類號: G01N33/96
• 分類號: G01N33/96;G01N33/535
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 馮慧

技術領域

本發明涉及生物芯片技術領域，尤其是涉及生物芯片技術在產前唐氏綜合癥篩查中的應用以及使用了新型的標記酶（SBP）和超高靈敏度的化學發光檢測方法。

背景技術

現在醫學檢驗技術正朝著標準化、智能化、集約化方向發展。生物芯片技術是這一趨勢的引領者，它是一種通過微加工技術和微電子技術將大量生物大分子如核酸片段、多肽分子、抗原、抗體等生物樣品有序地固化于玻片、硅片、玻璃片、塑料片、聚丙烯酰胺凝膠、尼龍膜等固相介質表面,組成密集二維的分子排列,然后與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交,通過特定儀器對雜交信號的強度進行快速、并行、高效檢測分析的技術。它能微型化、高能量、低成本地在短時間內分析大量的生物分子,使人們快速準確地獲取樣品中的生物信息,效率是傳統檢測手段的成百上千倍,解決了人們用1份血樣檢測機體多個系統功能狀態的需求。目前蛋白質芯片技術、微電極陣列芯片技術、液相芯片技術是比較成熟的生物芯片技術已逐步應用于臨床。

出生缺陷是指胚胎或胎兒發育過程中結構或代謝發生異常，出生時即可發現，也可在出生后數月或數年才發現。出生缺陷以及由此帶來的殘疾，給家庭、社會造成沉重的經濟負擔和心理負擔，成為影響人口素質的重要問題。我國出生缺陷的現狀已經不僅僅是一個嚴重的公共衛生問題，而且成為影響經濟發展和人們正常生活的社會問題。據統計我國2009年出生缺陷總發生率為128.38/萬，每年僅肉眼可見的出生缺陷就有20萬至30多萬，加上出生后數月和數年才顯現出來的缺陷，每年則高達80萬至120萬，約占每年大約2000萬個新生兒的4％－6％。目前，最常見的遺傳性或部分遺傳性缺陷主要有：先天性心臟病、神經管缺陷、唐氏綜合征、腦積水等等，由此可見，目前的唐氏篩查方法對胎兒先天缺陷的預測，具有一定的局限性，并不完全排除異常的可能性，因此需要開發新的檢測技術，提高檢測結果的靈敏度和準確性。

產前篩查技術通過分析孕期的某些篩查標志物，對宮內的胎兒進行評估，目的是為了在胎兒出生前發現可能導致出生缺陷的疾病。其基本方法就是在準確記錄孕婦相關資料的基礎上，監測各項標記物水平，然后通過專業分析軟件，計算胎兒罹患疾病的風險值。風險值高者即意味著該疾病的發生幾率大，需建議孕婦接受進一步的遺傳咨詢，以決定是否進行產前診斷和相應的處理。所謂標記物是指用于區分正常和非正常情況下的生化指標或其他測量指標，這些篩查標志物可以來源于母體血液，包括一些血清學指標（如糖蛋白、甾體激素、特異性抗體）、胎兒游離DNA、胎兒有核紅細胞等；或是超聲檢查的一些胎兒形態學指標、。經過多年的研究與實踐，這一技術日趨成熟，在國內外產前篩查臨床工作中得到廣泛應用，在很多發達國家和發展中國家，均作為必不可少的二級預防措施進行推廣。

國外對唐氏綜合征的產前篩查最早開始于上世紀80年代，英國學者在產前神經管缺陷（NTD）篩查母血甲胎蛋白（AFP）的過程中發現懷有唐氏綜合征的胎兒的孕婦血清AFP濃度下降，隨后相繼找到了與唐氏綜合征胎兒胎兒相關的孕中期標志物，這些標志物基本都由胎兒及胎兒附屬物分泌合成。目前唐氏篩查常用的血清學篩查標志物包括甲胎蛋白（AFP）、人絨毛膜促性腺激素（HCG）、游離雌三醇（uE3）、妊娠相關蛋白A(PAPP-A)抑制素-A（INH－A）等。不同的孕周，正常胎兒與唐氏綜合征或者18-三體胎兒的檢測值是不同的，其中以AFP、HCG和uE3結合的孕中期“三聯篩查”最出名，應用最廣泛，此后許多方案都是以該方案為基礎進行改良或組合的。

目前篩查標記物的常用檢測方法主要：時間熒光分辨法、酶聯免疫法、化學發光法和膠體金固相免疫層析技術。這些方法已經在臨床中得到很好的應用，并收到了預期的效果。但由于方法本身的限制以及生物樣品的多樣化，導致假陽性和漏檢增加。因此尋找新的特異性篩查標志物、開發新的檢測技術、實現自動化程度高的多標志物同時檢測，以提高檢測結果的靈敏度和準確性，將是對產前篩查血清學標志物檢測技術的重大創新，有助于產前篩查技術達到方便快捷、成本低廉、準確可靠的目標，對有效預防出生缺陷具有重要的意義。