[發(fā)明專利]一種生物高分子抑塵劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410107897.8
• 申請(qǐng)日: 2014-03-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103865489A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 莊茅;張燦;陳亞紅;王玉清;胡楊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 威海漢邦生物環(huán)保科技有限公司
• 主分類號(hào): C09K3/22
• 分類號(hào): C09K3/22;C12P19/04;C12N9/10;C12R1/01
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種生物高分子抑塵劑的制備方法，其特征在于包括按順序進(jìn)行的以下步驟：?

[步驟1]制備葡聚糖蔗糖酶液：?

a1.制備活化培養(yǎng)基：其配方為以下質(zhì)量百分含量的組分：蔗糖2.0％，酵母粉0.25％，蛋白胨0.5％，磷酸氫二鉀1％，氯化鈉0.05%，硫酸高鐵0.02%，余量為去離子水；調(diào)節(jié)pH至7.0-7.4，121℃下滅菌30分鐘，冷卻至25℃±2℃?zhèn)溆茫?

b1.制備產(chǎn)霉培養(yǎng)基：其配方為以下質(zhì)量百分含量的組分：蔗糖2.5％，酵母膏1.0％，蛋白胨0.5％，磷酸氫二鉀0.5％，氯化鈉0.05%，硫酸高鐵0.02%，硫酸鎂0.01%，余量為去離子水；調(diào)節(jié)pH至6.8-7.2，121℃下滅菌30分鐘，冷卻備用；?

c1.細(xì)菌活化：將4℃冰箱中培養(yǎng)于固體斜面上的明珠串球菌，接種于所制備的活化培養(yǎng)基中，80rpm、26℃下活化培養(yǎng)12h；?

d1.細(xì)菌發(fā)酵、產(chǎn)酶：以活化培養(yǎng)的菌液與發(fā)酵培養(yǎng)液的體積比為0.5%的比例，將活化培養(yǎng)的菌液無(wú)菌操作接種于所制備的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，以每立方米培養(yǎng)基通入1-2m³的標(biāo)準(zhǔn)通入消毒空氣，60rpm、28℃下發(fā)酵22-25小時(shí)，至pH下降至5.2-5.4、酶活力達(dá)到高峰時(shí)停止發(fā)酵；?

e1.酶的分離與純化：將上述步驟d1中的發(fā)酵液通過(guò)離心沉淀技術(shù)除去細(xì)菌，收集上清液，依次經(jīng)過(guò)沉淀、透析、吸附得到純的葡聚糖蔗糖酶液；或者直接用聚乙二醇萃取，分離得到初提純的葡聚糖蔗糖酶液，4℃下儲(chǔ)存?zhèn)溆茫?

[步驟2]制備所述綠色生物高分子抑塵劑的一級(jí)初產(chǎn)物：?

a2.配制蔗糖溶液：以白砂糖為原料，用無(wú)菌純水溶解成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%-25%的糖溶液，泵入反應(yīng)釜中；?

b2.用30%醋酸緩沖液調(diào)節(jié)反應(yīng)釜內(nèi)溶液pH至5.2-5.4；?

c2.對(duì)反應(yīng)釜進(jìn)行90-100℃、15-30min消毒處理，獲取無(wú)菌環(huán)境；?

d2.往反應(yīng)釜中添加步驟[1]中所制備的葡聚糖蔗糖酶液，添加葡聚糖蔗糖酶液和步驟a2中的糖溶液體積比為1.75%-2.92%，其中葡聚糖蔗糖酶液的酶活力值為456-480IU/ml；?

e2.用10%醋酸緩沖液調(diào)節(jié)反應(yīng)釜內(nèi)溶液pH至5.2-5.4；?

f2.控制攪拌轉(zhuǎn)速30-100rpm、溫度20-26℃，合成反應(yīng)進(jìn)行20-35h，以反應(yīng)產(chǎn)物的粘度為反應(yīng)終止參考;?

g2.待反應(yīng)終止時(shí)，加熱反應(yīng)釜至80-90℃，維持1h，然后降溫至40℃以下，使葡聚糖蔗糖酶失活，得到所述綠色生物高分子抑塵劑的一級(jí)初產(chǎn)物，其質(zhì)量濃度為15-25%；?

h2.一級(jí)初產(chǎn)物經(jīng)過(guò)真空濃縮系統(tǒng)，濃縮得到質(zhì)量濃度范圍在15-35%的一級(jí)初產(chǎn)物。?

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生物高分子抑塵劑的制備方法，其特征在于：還包括以下步驟：將所述步驟[2]中得到的質(zhì)量濃度為15-35%的一級(jí)初產(chǎn)物與質(zhì)量濃度為70%的低聚糖溶液混合，后者與前者混合體積比例在0/2-1/2之間，形成所述生物高分子抑塵劑的二級(jí)初產(chǎn)物。?

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種生物高分子抑塵劑的制備方法，其特征在于：還包括以下步驟：將所述二級(jí)初產(chǎn)物稀釋至質(zhì)量濃度為0.5-2%的范圍，再與石蠟乳液混合，后者與前者的混合體積比例在1/50-1/200之間，最終形成所述生物高分子抑塵劑終產(chǎn)品。?