[發明專利]急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離系統及體外分離方法

有效

• 申請號: 201410099247.3
• 申請日: 2014-03-17
• 公開（公告）號: CN104212703A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 唐斌;顏慶云;周卓龍;葛永梅
• 申請（專利權）人: 南方科技大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N5/09;C12N5/0789
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 何平

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其涉及一種急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離系統及體外分離方法。

背景技術

白血病，又名血癌，是一類造血干細胞惡性克隆性疾病。常見的白血病有急性髓細胞白血病（acute?myelocytic?leukemia，急性髓白血病細胞），急性淋巴細胞白血病（acute?lymphoblastic?leukemia，ALL），慢性粒細胞白血病（chronic?myelocytic?leukemia，CML），慢性淋巴細胞白血?。╟hronic?lymphocytic?leukemia，CLL）。白血病的主要病理特征為白血病細胞在骨髓及其他造血組織中呈惡性、無限制地增生，浸潤全身各組織和臟器，從而直接影響一些重要器官的功能，同時抑制正常造血，從而導致貧血、出血等各類并發癥。在我國，白血病是十大惡性腫瘤之一，流行病學調查顯示，目前至少有400萬白血病患者，而急性髓白血病細胞占各型白血病的58.9%。急性髓白血病細胞同時也是兒童及35歲以下人群死亡率較高的疾病。

現有急性髓白血病細胞治療的手段主要有化學藥物治療和骨髓移植。其中骨髓移植又分為自體和異體移植。異體移植受到患者年齡、合適配型的骨髓來源及并發移植物抗宿主的限制，因此只有約10～20%患者適合異體移植手術。造血干細胞具有自我更新為性質相同的造血干細胞和多向分化成各種血細胞成分的能力。因此，自體骨髓移植可通過采集患者自身體內骨髓或者其他部位的造血干細胞，患者經大劑量化療后再將體外凈化過的患者骨髓或者其他部位的造血干細胞移植回自體。與異體移植相比，自體移植具有不受骨髓來源和年齡限制、無移植物抗宿主病、植活容易、無需配型且無并發癥等諸多優點，具有重要的臨床應用價值。但自體骨髓移植的患者往往疾病復發率較高，主要原因是體外待移植物內白血病細胞凈化不徹底，從而使白血病細胞回流患者體內。因此，尋找一種有效的體外凈化方法是自體移植成功的關鍵之一。

目前己有數種方法可以將白血病細胞從干細胞中除去。例如，Suarez-Quian應用顯微解剖術將癌細胞一個一個地分離出來；Pituch-Noworolska?et?al.通過抗體介導的方法采用熒光激活細胞分類；Denis?et?al.利用磁場以磁性材料包被的抗體分離癌細胞。然而，這些癌細胞分離方法取決于得到腫瘤特異性抗體，或不同癌細胞獨特的形態學，使得分離較為復雜，且難度較大。

發明內容

鑒于此，有必要提供一種使急性髓白血病細胞與造血干細胞的分離較為簡單的急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離系統。

此外，還要提供一種急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離方法。

一種急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離系統，包括儲樣裝置、分離組件及收集裝置，所述分離組件包括外殼、固定座及微孔管，所述外殼具有一收容腔，所述固定座收容于所述收容腔內，并將所述收容腔分隔成第一腔室和第二腔室，所述微孔管固定設置于所述固定座上，且所述微孔管連通所述第一腔室和第二腔室，所述造血干細胞能夠通過所述微孔管，所述急性髓白血病細胞不能通過所述微孔管，所述儲樣裝置與所述外殼通過管道連接，以使所述儲樣裝置與所述第一腔室相通，所述收集裝置與所述外殼通過管道連接，以使所述收集裝置與所述第二腔室相通。

在其中一個實施例中，所述微孔管的材質為玻璃、樹脂或纖維。

在其中一個實施例中，還包括蠕動泵，所述蠕動泵通過管道連通所述收集裝置和所述第一腔室，以使所述外殼、微孔管、收集裝置及蠕動泵通過管道連通構成循環回路。

在其中一個實施例中，還包括第一閥門、儲液裝置、抽液泵及第二閥門，所述第一閥門設置于所述循環回路上，所述抽液泵通過管道連通所述儲液裝置和所述第二腔室，所述第二閥門設置于連通所述抽液泵與所述第二腔室的管道上。

在其中一個實施例中，所述收容腔的側壁上開設有卡槽，所述固定座上設有與所述卡槽相配合的卡扣。

一種急性髓白血病細胞與造血干細胞的體外分離方法，包括如下步驟：