[發(fā)明專(zhuān)利]小麥矮桿基因RhtDC20緊密連鎖的SSR標(biāo)記Xgwm537及其用途有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410098895.7 | 申請(qǐng)日： | 2014-03-17 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN103834647A | 公開(kāi)（公告）日： | 2014-06-04 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉錄祥;郭會(huì)君;向小華;謝永盾;趙林姝;張昕;古佳玉;李軍輝;趙世榮 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C12N15/11 | 分類(lèi)號(hào)： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129 | 代理人： | 吳泳歷 |
| 地址： | 100081 北*** | 國(guó)省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 小麥 基因 rht sub dc20 緊密 連鎖 ssr 標(biāo)記 xgwm537 及其 用途 | ||
1.小麥矮桿基因RhtDC20緊密連鎖的SSR標(biāo)記Xgwm537，其上游引物的核苷酸序列為：5’ACA?TAA?TGC?TTC?CTG?TGC?ACC3’；下游引物的核苷酸序列為：5’GCC?ACT?TTT?GTG?TCG?TTC?CT3’，擴(kuò)增的特征條帶的長(zhǎng)度為207bp。
2.一種篩選具有矮桿基因RhtDC20的小麥材料的方法，其步驟如下：
（1）檢測(cè)：采用所述SSR標(biāo)記Xgwm537的上、下游引物對(duì)待測(cè)小麥材料的基因組進(jìn)行PCR擴(kuò)增和檢測(cè)，
（2）結(jié)果判斷：擴(kuò)增結(jié)果中出現(xiàn)長(zhǎng)度為207bp所示的特征條帶的材料為具有矮桿基因RhtDC20的小麥材料，
所述SSR標(biāo)記Xgwm537的上游引物的核苷酸序列為：5’ACA?TAA?TGC?TTC?CTG?TGC?ACC3’；下游引物的核苷酸序列為：5’GCC?ACT?TTT?GTG?TCG?TTC?CT3’。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系為15μL，包括1×PCR?Buffer（含Mg2+），0.25mM?dNTPs，250nM引物，1U?Taq?DNA聚合酶，100ng基因組DNA，超純水補(bǔ)足至15μL。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，所述擴(kuò)增的程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性4min，94℃變性1min；60℃退火1min，72℃延伸1min，35個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。
5.根據(jù)權(quán)利要求2～4任一所述的方法，所述檢測(cè)指擴(kuò)增產(chǎn)物變性后用6.0%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)，80W恒功率電泳80min，快速硝酸銀染色觀察。
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