[發(fā)明專利]一種川貝母開放式組織培養(yǎng)用抑菌劑及其使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410097129.9
• 申請(qǐng)日: 2014-03-11
• 公開（公告）號(hào): CN103875732A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 段曉宇;唐敏;葉萌;張健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01N65/36
• 分類號(hào): A01N65/36;A01N3/00;A01H4/00;A01N59/00;A01N43/90
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• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種川貝母開放式組織培養(yǎng)用抑菌劑，其特征是：包括抑菌劑I和抑菌劑II；

所述抑菌劑I由下述重量份的組分組成：絲瓜水50-70份、金銀花提取液10-15份、艾葉提取液10-20份、黃柏提取液10-15份、花椒提取液5-15份、紫草提取液10-15份、黃連提取液5-10份、蒲公英提取液10-15份、茵陳提取液10-15份、大青葉提取液10-15份、阿莫西林舒巴坦100-200份、PVP70-200份、二氧化氯0.7-7份以及維生素C35-50份；

所述抑菌劑II由下述重量份的組分組成：絲瓜水50-70份、金銀花提取液10-15份、艾葉提取液10-20份、黃柏提取液10-15份、花椒提取液5-15份、紫草提取液10-15份、黃連提取液5-10份、蒲公英提取液10-15份、茵陳提取液10-15份、大青葉提取液10-15份、阿莫西林舒巴坦150-300份、PVP-I150-500份以及二氧化氯7-70份。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑菌劑，其特征是：

所述抑菌劑I由下述重量份的組分組成：絲瓜水60份、金銀花提取液13份、艾葉提取液15份、黃柏提取液12份、花椒提取液10份、紫草提取液12份、黃連提取液8份、蒲公英提取液13份、茵陳提取液13份、大青葉提取液12份、阿莫西林舒巴坦130份、PVP150份、二氧化氯4份以及維生素C40份；

所述抑菌劑II由下述重量份的組分組成：絲瓜水60份、金銀花提取液13份、艾葉提取液15份、黃柏提取液12份、花椒提取液10份、紫草提取液12份、黃連提取液8份、蒲公英提取液13份、茵陳提取液13份、大青葉提取液12份、阿莫西林舒巴坦200份、PVP-I210份以及二氧化氯20份。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抑菌劑的制備方法，其特征是：所述金銀花提取液、艾葉提取液、紫草提取液、蒲公英提取液、茵陳提取液和大青葉提取液由下述方法制備：

分別取金銀花、艾葉、紫草、蒲公英、茵陳和大青葉，放入純水中在100℃下煮3-4次，每次煮到液體濃縮至1/4為止，過(guò)濾，取濾液，分別裝入容器中備用；其中，每次加水量為上次濃縮后溶液量的4-5倍；

所述絲瓜水、黃柏提取液、花椒提取液、黃連提取液由下述方法制備：取絲瓜、黃柏、花椒、黃連放入干燥箱中在160℃下烘烤至顏色變?yōu)樯詈稚〕觯髯匝心コ煞郏辉賹⒎勰┲糜隗w積分?jǐn)?shù)為60％的乙醇溶液中浸泡10-20天，過(guò)濾，取濾液，分別裝入容器中備用。

4.一種利用權(quán)利要求1或2所述的抑菌劑開放式培養(yǎng)川貝母的方法，包括：

1)外植體消毒滅菌：選取川貝母的鱗莖、種子或葉片作為外植體，將外植體用水沖洗20分鐘，放入體積分?jǐn)?shù)為20％的抑菌劑II中浸泡10-15min，再用無(wú)菌水沖洗2-3次，濾干水分，用經(jīng)抑菌劑II浸泡過(guò)的解剖刀對(duì)表面滅菌后的外植體進(jìn)行切割，待接種；

2)接種操作：接種室內(nèi)用臭氧發(fā)生機(jī)或紫外線進(jìn)行空氣滅菌，接種的器具用體積比75％的酒精消毒后，浸泡于體積分?jǐn)?shù)為50-80％的抑菌劑II中滅菌1-2h；

3)組織培養(yǎng)：將步驟1)制得的外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)20-30天后，轉(zhuǎn)接到增殖繼代培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；經(jīng)過(guò)增殖繼代培養(yǎng)后，再將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)；

其中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：蔗糖30g·L^-1+瓊脂4g·L^-1+MS+6-BA1.0-2.0mg·L^-1+NAA0.5-1.0mg·L^-1+GA0.5-1.5mg·L^-1+抑菌劑I15-25ml·L^-1；

所述增殖繼代培養(yǎng)基為：蔗糖30g·L^-1+瓊脂4g·L^-1+MS+6-BA1.5-2.0mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1+抑菌劑I10-15ml·L^-1；

所述生根培養(yǎng)基為：蔗糖30g·L^-1+瓊脂4g·L^-1+1/2MS+NAA0.5-1.0mg·L^-1+抑菌劑I10-15ml·L^-1；

4)移栽：將進(jìn)行生根培養(yǎng)后的川貝母組培苗進(jìn)行煉苗后移栽。