[發明專利]紫丹參甲素磺酸鈉的制備方法

有效

• 申請號: 201410093550.2
• 申請日: 2014-03-14
• 公開（公告）號: CN103864884A
• 公開（公告）日: 2014-06-18
• 發明（設計）人: 洪勇;琚姝;黃臻輝
• 申請（專利權）人: 上海第一生化藥業有限公司
• 主分類號: C07J73/00
• 分類號: C07J73/00
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 朱水平;王衛彬

1.一種紫丹參甲素磺酸鈉的制備方法，其包括下述步驟：采用高效液相反相色譜法分離丹參酮類磺化液，即可；

其中，高效液相反相色譜法的條件如下：

流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%乙胺-水、流動相B為0.1%乙胺-甲醇；或，流動相A為水、流動相B為甲醇；百分比為組分占流動相的體積百分比；檢測波長為271nm，保留時間為50～70min。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的高效液相反相色譜法包括富集純化、中間純化和精制純化；其中，所述的富集純化的條件如下：

流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%乙胺-水、流動相B為0.1%乙胺-甲醇；或，流動相A為水、流動相B為甲醇；流速為80～120mL/min，檢測波長為271nm；

將丹參酮類磺化液與流動相A按體積比為1:4的混合物上樣29～30min，80%流動相A+20%流動相B平衡1min，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫45min：80%A+20%B→35%A+65%B，再以100%流動相B再生10min，收集保留時間為50～70min的洗脫液得到富集純化樣品溶液；

所述的中間純化的條件如下：

流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%乙胺-水、流動相B為0.1%乙胺-甲醇；或，流動相A為水、流動相B為甲醇；流速為80～120mL/min，檢測波長為271nm；

將所述的富集純化樣品溶液與流動相A按體積比為1:1的混合物上樣28min，80%流動相A+20%流動相B平衡1～2min，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫40min：80%A+20%B→40%A+60%B，再以100%流動相B再生10min，收集保留時間為50～65min的洗脫液得到中間純化樣品溶液；

所述的精制純化的條件如下：

流動相A為0.1%三乙胺-水、流動相B為0.1%三乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%二乙胺-水、流動相B為0.1%二乙胺-甲醇；或，流動相A為0.1%乙胺-水、流動相B為0.1%乙胺-甲醇；或，流動相A為水、流動相B為甲醇；流速為20～30mL/min，檢測波長為271nm；

將所述的中間純化樣品溶液與流動相A按體積比為1:1的混合物上樣20min，80%流動相A+20%流動相B平衡4min，以流動相A和流動相B按照下述體積比進行線性梯度洗脫35min：80%A+20%B→45%A+55%B，再以100%流動相B再生10min，收集保留時間為50～60min的洗脫液得到精制純化樣品溶液。

3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的富集純化采用的裝置如下：采用PrepStar?SD-1制備系統和L&L4002色譜柱，裝PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g，動態軸向壓縮系統裝填至壓力650psi，靜態鎖緊至柱床高度25cm；柱溫為10～30℃；

和/或，所述的中間純化采用的裝置如下：采用PrepStar?SD-1制備系統和L&L4002色譜柱，裝PLRP-S反相C18聚合物填料160.0g，動態軸向壓縮系統裝填至壓力650psi，靜態鎖緊至柱床高度25cm；柱溫為10～30℃；

和/或，所述的精制純化采用的裝置如下：采用PrepStar?SD-1制備系統和L&L4001色譜柱，裝ODS-AQ反相C18硅膠填料80.0g，動態軸向壓縮系統裝填至壓力650psi，靜態鎖緊至柱床高度25cm；柱溫為10～30℃。

4.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的富集純化中，所述的流速為100mL/min；

和/或，所述的中間純化中，所述的流速為100mL/min；

和/或，所述的精制純化中，所述的流速為25mL/min。