[發明專利]兔腦組織因子凍干制劑的制備方法

有效

• 申請號: 201410093404.X
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN103852362A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 陸曉華;汪全海;徐蕾;王國光;李偉;趙雪
• 申請（專利權）人: 皖南醫學院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 蕪湖安匯知識產權代理有限公司 34107
• 代理人: 朱圣榮

技術領域

本發明屬于生物醫學制劑的技術領域。更具體地說，本發明涉及一種兔腦組織因子凍干制劑的制備方法。

背景技術

上世紀七十年代，為了研究彌散性血管內凝血（DIC），而研制獲得的兔（狗）腦粉（FⅢ：組織因子的粗制品）。兔（狗）腦粉（FⅢ：組織因子的粗制品）作為彌散性血管內凝血（DIC）動物模型啟動因子及DIC血液學診斷指標凝血酶原時間（PT）和活化部分凝血活酶時間（APTT）的檢測具有重要價值。

但是，在現有技術中，兔腦凝血活酶（FⅢ：組織因子）只有粉劑，只有用兔腦凝血活酶制成的凝血酶原時間（PT）測定試劑盒。使用時，需要經過預熱激活一個小時，然后離心、過濾等過程，才后能使用。

另外，現有技術中的制劑的保質期較短，只有8個月。

但是，在現有技術中，市售只有兔腦粉劑（實際上只是FⅢ：組織因子的粗制品）。使用時，需要經過預熱激活、孵育60min，然后經離心、過濾等過程后，才能使用，使用起來較麻煩。另外，現有技術中兔腦粉劑的技術質量不穩定、保質期較短，－20C保存保質期只有6個月。

發明內容

本發明提供兔腦組織因子凍干制劑的制備方法，其目的是質量更穩定、使用更方便、保質期更長。

為了實現上述目的，本發明采取的技術方案為：

本發明的兔腦組織因子凍干制劑的制備方法，其步驟是：

a、取新鮮兔腦，剝去腦膜及血管，棄去腦干，用生理鹽水洗凈；置于清潔乳缽內，加入丙酮至剛浸沒兔腦；

b、用研錘研磨，然后，倒去丙酮；再加入新丙酮研磨后再倒去丙酮；如此反復三次；

c、用濾紙濾去丙酮；

d、將濾去丙酮后的兔腦置于37℃烤箱并攤開，使丙酮蒸發烤干，制成兔腦粉，即兔腦組織因子粗制品，其活力PT≦13S；

e、取按上述步驟制得的兔腦組織因子，即兔腦粉，加生理鹽水，攪勻后放入37℃恒溫水浴內預熱激活、孵育60min，每隔15min攪拌一次；

f、然后離心分離；取離心分離得到的上清液過濾后，即得到兔腦組織因子懸液。

g、取兔腦組織因子懸液加入小瓶內，凍干、抽氣、壓瓶，即制成兔腦組織因子凍干制劑，－20℃保存。

在所述的步驟f中，離心分離的參數為1000轉/min，時間為5min。

在所述的步驟e中，取兔腦粉400mg，加生理鹽水至10ml。

在所述的步驟g中，所述的小瓶規格為5ml或10ml，即制成兔腦組織因子5ml/瓶或10ml/瓶凍干制劑。

使用時，將兔腦組織因子5ml/瓶加蒸餾水5ml，或10ml/瓶凍干制劑加蒸餾水10ml，即分別制成5ml或10ml的兔腦組織因子懸液。

本發明采用上述技術方案，兔腦組織因子（FⅢ：組織因子）從兔腦組織中提取，腦組織含量最高；制成兔腦粉（組織因子的粗制品）再制成兔腦組織因子5ml/瓶或10ml/瓶凍干制劑，因此，技術更加成熟、質量更穩定、保質期更長（≥12月），使用起來更方便；效價比更高；使用時只要加蒸餾水溶解就可以使用，不需經過預熱激活、孵育、離心、過濾等過程，在臨床醫學診斷、治療、彌散性血管內凝血（DIC）等血液病的實驗研究以及實驗教學等領域有著廣泛的用途，具有極高醫學教學、科研、臨床診斷、治療及經濟價值。

具體實施方式

下面通過對實施例的描述，對本發明的具體實施方式作進一步詳細的說明，以幫助本領域的技術人員對本發明的發明構思、技術方案有更完整、準確和深入的理解。

本發明為一種兔腦組織因子凍干制劑的制備方法，將兔腦粉（FⅢ：組織因子粗制品）制成5ml/瓶或10ml/瓶凍干制劑，技術更加成熟、質量更穩定、保質期更長、使用起來更加方便，可以廣泛應用在醫學教學、科研和臨床診斷治療中。

為了解決現有技術存在的問題并克服其缺陷，實現使用更方便、技術更成熟、質量更穩定、保質期更長的發明目的，本發明采取的技術方案為：

上述兔腦組織因子凍干制劑的制備方法的步驟是：

a、取新鮮兔腦，剝去腦膜及血管，棄去腦干，用生理鹽水洗凈；置于清潔乳缽內，加入丙酮至剛浸沒兔腦；

b、用研錘研磨，然后，倒去丙酮；再加入新丙酮研磨后再倒去丙酮；如此反復三次；

c、用濾紙濾去丙酮；

d、將濾去丙酮后的兔腦置于37℃烤箱并在箱內攤開，使丙酮蒸發烤干，制成兔腦粉，即兔腦組織因子粗制品，其活力PT≦13S；