[發明專利]一種用于有毒物質提取的QuEChERS提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201410093300.9
• 申請日: 2014-03-14
• 公開（公告）號: CN103822814A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 邵兵;郭巧珍;高馥蝶;張晶;李敏
• 申請（專利權）人: 北京市疾病預防控制中心
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種樣品前處理方法及其應用，具體為一種用于有毒物質提取的QuEChERS提取方法，特別適應于食物中毒樣品中未知毒物的提取，實現食物中毒的快速篩查。

背景技術

QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged?and?Safe的簡稱)方法是近幾年發展起來的快速前處理法，可以方便、經濟、快速地從食品基質中將目標化合物提取出來。最原始的QuEChERS方法沒有緩沖鹽，只有MgSO4和NaCl，目前國際上推薦使用的QuEChERS方法有：歐盟EN15662方法和AOAC中的用法，EN15662和AOAC官方2007.01方法改進了最原始的方法，在萃取步驟中加了緩沖鹽，這可以擴大目標化合物范圍，這兩個方法主要針對的基質是水果蔬菜，測定的目標化合物主要為農藥，其中QuEChERS方法表述為：萃取管的填料為4g?MgSO4，1g?NaCl，1g檸檬酸鈉，0.5g檸檬酸氫二鈉(EN15662)，6gMgSO4，1.5g醋酸鈉(AOAC2007.01方法)，凈化管的填料根據基質的含脂肪量和色素的多少選擇性的加入：150mg?PSA或者C18，或者石墨化碳，和900mg?MgSO4。

QuEChERS方法一般包括兩步：一是有機溶劑萃取，二是凈化上清液。QuEChERS常用乙腈為提取溶液，雖然脂肪在乙腈中的溶解度不高，但是提取液中仍有相當數量的脂肪共提物存在，這就需要改進QuEChERS的凈化方法以適應高脂肪含量基質。常用的凈化吸附劑包括：N-丙基乙二胺填料(primary?secondary?amine，PSA)、石墨化炭黑(graphitised?carbon?black，GCB)和C18，三種填料可適應不同基質凈化需求，可單獨使用，也可配合使用。此外，QuEChERS緩沖鹽水溶液也是提取的很好選擇，它可以兼顧不同化合物的pH值，尤其對pH敏感化合物的提取效果良好。可以說，QuEChERS方法的提取凈化步驟雖然簡單，卻需要研究者依據實驗進程不斷做出調整。

目前該方法主要用于果蔬中農藥殘留的分析，同時也有少部分應用于牛奶、肌肉、雞蛋、肝臟等動物性食品基質中喹諾酮類、磺胺類、苯并咪唑類、阿維菌素類抗生素的獸藥殘留檢測，但是由于獸藥種類多樣，性質各異，給多項殘留分析檢測工作帶來一定挑戰。提取液方面，Lombardo-Agui等(Journal?of?Chromatography?A，2011，1218(30)：4966-4971)基于EN15662方法，使用pH7.0的NaH2PO4緩沖溶液和含5％甲酸的乙腈作為萃取劑，分析牛奶中的喹諾酮類藥物。張毅等(色譜，2011，29(6)：523-534)人使用酸化乙酸乙酯作為提取溶劑分析飼料中的激素類藥物。吸附劑的選擇方面，Stubbings(Journal?of?Chromatography?A，2008，1205(1)：10-16)等人利用NH2吸附劑凈化雞肉和雞肝樣品。董靜等(中國衛生檢驗雜志，2008，18(1)：26-28)則選擇C18、PSA和氧化鋁作為凈化劑。另外，一些創新性的QuEChERS方法逐步被開發出來，Vidal等(Analytical?and?Bioanalytical?Chemistry,2010，397(7)：2777-2790)分析牛奶樣品時，僅用QuEChERS中的萃取步驟，提取后直接通過LC-MS／MS分析，獲得理想的結果；Karageorgou等(Journal?of?Separation?Science，2011，34(15)：1893-1901)在分析牛奶中青霉素時，創新性地將親水親脂固相萃取填料Strata-X與MgSO4、PSA、C18吸附劑結合，通過一步分散固相萃取完成前處理過程。

現階段，QuEChERS方法主要集中在單一基質中少量化合物的提取凈化方法，由于其快速便捷的前處理過程和出色的提取效率，研究者通過對QuEChERS方法進行改進來適應不同基質中多組分的同時檢測需要，設計并開發出一種能夠從動物性食品基質和生物基質中快速提取不同極性化合物的前處理方法并應用于快速篩查檢測是十分必要的。