[發(fā)明專利]一種水牛角提取液的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410091505.3
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN103860596B
• 公開（公告）日: 2017-01-18
• 發(fā)明（設計）人: 朱志杰;李麗靜
• 申請（專利權）人: 通化金馬藥業(yè)集團股份有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12P21/00;A61K35/32;A61P29/00
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司22205
• 代理人: 王偉

技術領域

本發(fā)明屬于中藥有效成分提取方法技術領域，即水牛角提取液的制備方法。具體設計一種先進的動物角類藥物的提取方法，利用冷凍粉碎及膠體磨進行超微粉碎，提高了提取面積，增加了提取收率，充分的利用藥材資源，同時模擬藥物進入胃腸后的消化吸收環(huán)境而進行的水解，并通過膜分離技術進行純化的，進行難以通過水煎方式進行提取的角類藥材新的提取方法。

背景技術

水牛角為牛科動物水牛Bubalus?bubalis?Linnaeus的角，收載于《中國藥典》2010版一部77頁，具有清熱涼血、解毒定驚的功效，主要用于溫病高熱，神昏譫語，發(fā)斑發(fā)疹，吐血、驚風、癲狂等證。為中藥犀角的替代品，是常用中藥，鎊片或搓成粗粉15-30g，先煎3小時以上使用。現(xiàn)代化學成分研究表明，水牛角含多種氨基酸、膚類、蛋白質、角纖維、當醇類、肌類、強心苷類等化學成分。藥理作用研究結果證明水牛角水煎液有抗感染、縮短凝血時間以及鎮(zhèn)靜等作用，但由于角類藥材質地堅實，提取比較困難，所以傳統(tǒng)角類藥物均挫末用藥汁兌服，但由于水牛角作為犀角的替代品用量很大，所以人們經常采用水提、酸水解、堿水解、酸堿水解、酶解等方式進行提取，由于水牛角質地致密，提取率非常低，同時，由于不同的酶，酶切位點各異，酶的選擇影響了水解解物中肽段的分子量大小及氨基酸組成,?從而導致的酶解產物生物活性的差異.?總提取的成分與機體內自然吸收的成分存在差異性，有的工藝還有鋇殘留。

冷凍粉碎技術利用了物料在低溫狀態(tài)下的“低溫脆性”,即物料隨著溫度的降低,其硬度和脆性增加,而塑性及韌性降低,在一定溫度下,用一個很小的力就能將其粉碎。冷凍粉碎技術可獲得更細的粉末,使物料的流動性得到較大改善,等條件時冷凍粉碎的處理能力顯著高于常溫粉碎并可以保持藥材的有效成分。

膠體磨勻漿技術，是一種比較新的濕法粉碎技術，通過膠體磨勻漿，可以把難粉碎的藥材進行粉碎，提高了不易被溶劑穿透而進行提取的藥材的提取面積。?

膜分離技術因操作條件溫和,能耗又低,?被認為是分離小肽及氨基酸體系的理想方法。以往方法,提取效果差，收率低。

發(fā)明內容

為了改進水牛角的提取方法，更好的提高水牛角藥材的利用率，更好的利用水牛角藥材，得到純度較高、更接近機體的吸收的提取液成分，提供了水牛角的提取方法。

????采用冷凍粉碎和膠體磨濕法粉碎相結合，配合仿胃腸道環(huán)境的仿生態(tài)提取技術，結合先進的膜分離技術，提取水牛角中的活性成分，是一個低風險、高產出的項目，具有很高經濟效益和社會效益的方式。可以改善節(jié)約藥材資源，更好的提取和保證水牛角有效成分，增加含水牛角產品的價值和市場競爭力，為中藥角類藥物的新產品開發(fā)開辟了新的道路。

本發(fā)明的目的是提供一種水牛角提取液的制備方法，其是將水牛角表面刷洗干凈后拋片、冷凍粉碎，然后投入膠體磨進行濕法粉碎，研磨液加入人工胃液提取（酸及胃蛋白酶水解）和人工腸液提取（胰蛋白酶、糜蛋白酶水解），每步后均加熱進行酶滅活，合并提取液，調PH值，微孔濾膜過濾、超濾（切割相對分子量分子量20000）除去加入蛋白酶及大分子雜質的，收集后濃縮成水牛角提取液或噴霧干燥得水牛角提取物。

一種水牛角提取液的制備方法，其特征在于步驟如下：

1.將水牛角刷凈表面，電刨薄片后放入液氮中冷凍后進行粉碎。

2.將冷凍粉碎得水牛角粉，按料液比1:1-1:10投入膠體磨進行濕法粉碎，得研磨液。

3.將上述研磨液，加熱至沸騰，沸騰后微沸狀態(tài)繼續(xù)提取2-6h。然后分離提取液，水牛角繼續(xù)加水（料液比1:1-1:10）重復上述步驟提取2-4次，過濾后合并提取液濃縮后備用；水牛角藥渣備用。

4.將步驟3水提后的水牛角藥渣，加入人工胃液進行水解（料液比1:1-1:10），溫度39℃，水解4-6小時，加熱至85℃滅活蛋白酶，過濾后上清液濃縮備用，水牛角藥渣備用；所述人工胃液按《中國藥典》附錄配制：稀鹽酸16.4ml，加水800ml與胃蛋白酶10g，搖勻后，加水衡釋至100ml，用量同比例放大；采用人工胃液進行水解，與水牛角粉末服用后進入機體在胃中的pH值、酶的種類和濃度等消化條件一致，通過這種仿生方法，在體外得到與體內一致的水解物，避免以往酸堿酶水解法導致的過度水解或水解不到位，避免由于不同的酶，酶切位點各異，酶的選擇影響了水解解物中肽段的分子量大小及氨基酸組成,?從而導致的酶解產物生物活性的差異。