[發明專利]葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葎草葉蛋白和總黃酮的方法

有效

• 申請號: 201410091468.6
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN103819534A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 王桃云;薛凱;陳子欣;張慈安;閔輝
• 申請（專利權）人: 蘇州科技學院
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;A61K36/60;A61K127/00;A61K135/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌;曹翠珍

技術領域

本發明屬于植物有效成分提取工藝的方法，具體涉及一種葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葎草葉蛋白和總黃酮的方法。

背景技術

葎草[Humulus?scandens(Lour.)Merr.]又名拉拉藤、拉拉秧、五爪龍、大葉五爪龍、割人藤等，為桑科葎草屬草本植物，分布于我國除新疆、青海以外的所有省份，資源十分豐富。葎草營養成分較為全面，據分析，葎草鮮草粗脂肪、粗纖維的含量分別為0.6%、2.1%。葎草干物質中含有粗蛋白12.8%～20.46%，總黃酮含量約為2.03%，粗纖維15.4%～23.2%，無氮浸出物33.4%～41.8%，灰分7.1%～9.8%，鈣0.84%～1.46%，磷0.26%～0.32%，以及Fe、Mn、Cu、Zn、VC、VE、葉綠素、胡蘿卜素等多種微量元素及維生素。此外，葎草還含有木犀草素、葡萄糖甙、膽堿、揮發油、樹脂等物質及葎草酮、蛇麻酮、牡荊素、B-葎草烯、石竹烯等多種化學活性物質。從而具有清熱解毒、利尿消腫、消炎除濕、健胃化食等多種藥理功效。因此，葎草具有很好的開發利用價值。

目前有關葎草葉蛋白提取的工藝只有王桃云等進行了研究（王桃云等，葎草葉蛋白提取工藝的優化，蘇州科技學院學報--自然科學版，2005，22-1：59～64），但其提取工藝只試驗了單因素對葉蛋白得率的影響，未能進行多因素綜合試驗，致使工藝的穩定性和重復性較差，另外葎草葉蛋白的得率也較低。

葎草黃酮的提取工藝研究有很多，但多是采用乙醇溶液提取。目前，提取葎草葉蛋白和黃酮的方法各自分開，都是以提取單項物質為目的，這樣導致這些工藝存在重復處理、費時，無法對葎草資源進行深度利用，浪費葎草資源等問題。對于從葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葉蛋白和總黃酮的工藝尚無先例，而葎草莖葉中富含蛋白質（干物質百分含量達12.8%～20.46%）和總黃酮（干物質百分含量約為2.03%）。因此，研發出一種從葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葉蛋白和總黃酮的方法，對于提高葎草鮮嫩莖葉加工的效益，深度開發和利用葎草資源具有十分重要的意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葎草葉蛋白和總黃酮的方法，使得葎草中的葉蛋白和黃酮這兩種重要的有效成分能同時得以開發利用，所得葉蛋白和總黃酮得率、純度較高，葉蛋白提取率在85%以上、純度在60%以上，總黃酮提取率在85%以上、純度在60%以上，工藝條件準確可靠、適用于大規模生產。

葎草鮮嫩莖葉中同時分級提取葎草葉蛋白和總黃酮的方法，包括以下步驟：

步驟1，取葎草莖葉，洗凈晾干后，測定含水量和濕重，然后將其切成片段；

步驟2，將步驟1所得葎草莖葉加入9～11倍重量的水中，勻漿4～6min，然后壓濾得到葎草漿汁和濾餅；

步驟3，將步驟2所得葎草漿汁先在pH9～11、65～75℃條件下進行加熱和堿性沉降，然后離心得上清液和沉淀，沉淀物經冷凍干燥即得葎草葉蛋白；

步驟4，將步驟2所得葎草漿汁和步驟3所得上清液混合，在pH9～11、70～90℃條件下提取30～90min，然后滴加酸液調節pH2～4，離心，所得沉淀經水洗、乙醇溶解、抽濾后，將濾液濃縮、冷凍干燥即得葎草葉總黃酮。

作為上述發明的進一步優選，所述步驟2中勻漿時間為5.5min。

作為上述發明的進一步優選，所述步驟3中堿性沉降pH為10，沉降溫度為71℃。

作為上述發明的進一步優選，所述步驟4中提取條件為pH11、溫度90℃，提取時間為30min，滴加酸液后混合液pH為3。

本發明與現有技術相比，其顯著優點在于：第一，本發明在一次工藝工程中同時分級提取葎草葉蛋白和葎草總黃酮，使得葎草中的葉蛋白和黃酮這兩種重要的有效成分能同時得以開發利用，提升了葎草資源的開發利用價值；第二，本發明克服了以往葎草總黃酮制備工藝中采用比色法定量導致測定總黃酮含量偏高且不能直接獲取總黃酮的缺點，利用優化的堿提酸沉法獲得較高純度的葎草總黃酮；第三，所得葉蛋白和總黃酮得率、純度較高，葉蛋白提取率在85%以上、純度在60%以上，總黃酮提取率在85%以上、純度在60%以上；第四，采用響應面和正交設計方法優化葎草葉蛋白和葎草總黃酮的提取工藝，確保了提取工藝條件準確可靠，具有安全、經濟等特點，適用于大規模生產。

附圖說明